全基因组甲基化测序

发布时间：2025-12-29

全基因组甲基化测序是一种用于分析生物样本全基因组范围内DNA甲基化修饰的高通量技术。该检测通过亚硫酸氢盐处理结合高通量测序，精确识别5-甲基胞嘧啶位点。检测过程涵盖文库构建、测序、数据质控及生物信息学分析，结果可用于表观遗传学研究、疾病标志物筛查及发育生物学分析。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

DNA提取与质控：从各类生物样本中分离高质量基因组DNA，通过紫外分光光度法和荧光定量法检测DNA浓度、纯度及完整性，确保符合建库要求。

亚硫酸氢盐转化处理：使用亚硫酸氢盐将未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，而甲基化胞嘧啶保持不变，为后续测序提供基础模板。

全基因组文库构建：将经转化的DNA片段化后连接测序接头，通过PCR扩增富集目标片段，构建可用于高通量测序的DNA文库。

高通量测序：采用二代测序平台对文库进行双端测序，获得覆盖全基因组的原始序列数据，确保足够的测序深度和覆盖度。

原始数据质量控制：对测序产生的原始数据进行质量评估，包括碱基质量分布、接头污染检测及序列重复率分析。

序列比对与定位：将质控后的序列与参考基因组进行比对，识别每条读段在基因组中的精确位置。

甲基化位点识别：通过比对序列中胞嘧啶与胸腺嘧啶的转换情况，在全基因组范围内鉴定5-甲基胞嘧啶的具体位点。

甲基化水平定量：计算每个CpG位点或区域的支持读段数及甲基化胞嘧啶比例，获得定量甲基化水平数据。

差异甲基化区域分析：通过统计学方法比较不同样本组间甲基化水平的显著性差异，识别差异甲基化区域。

功能富集与通路分析：将差异甲基化区域注释到相关基因启动子区或功能元件，进行基因功能及信号通路富集分析。

人类外周血白细胞DNA：用于疾病表观遗传标志物筛查及群体遗传学研究，需确保样本新鲜度及无溶血现象。

动物组织标本：包括哺乳动物器官组织及胚胎样品，适用于发育生物学及比较表观遗传学分析。

植物基因组DNA: 涵盖农作物叶片及种子组织，用于植物表观遗传调控机制及抗逆性研究。

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。