细胞代谢流实验
发布时间：2026-01-04
细胞代谢流实验是通过追踪同位素标记底物在代谢网络中的流向与转化速率，定量分析细胞内代谢通路活性的关键技术。该技术涉及稳定的同位素标记、代谢物提取与分离、质谱数据采集与通量计算等多个严谨步骤，用于揭示生理或病理状态下细胞的真实代谢状态。
注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
葡萄糖摄取速率测定：通过检测细胞对培养基中标记葡萄糖的消耗速度，评估细胞糖酵解途径的入口活性，是能量代谢研究的基础指标。
乳酸生成速率测定：定量分析细胞糖酵解终产物乳酸的分泌速率，反映细胞在有氧条件下的糖酵解活跃程度，即瓦博格效应。
谷氨酰胺代谢流分析：追踪碳13或氮15标记的谷氨酰胺在细胞内的命运，解析其进入三羧酸循环、参与核苷酸合成或产生谷胱甘肽等抗氧化物的通量。
脂肪酸氧化通量测定：利用放射性或稳定性同位素标记的脂肪酸，测量其β-氧化过程生成乙酰辅酶A并进入三羧酸循环的速率，评估脂质供能能力。
三羧酸循环中间体周转率分析：通过分析标记葡萄糖或谷氨酰胺衍生碳原子在柠檬酸、α-酮戊二酸、琥珀酸等中间体中的标记模式，精确计算循环各节点的通量。
磷酸戊糖途径通量分析：比较葡萄糖不同碳原子标记模式下核糖-5-磷酸的富集情况，定量评估磷酸戊糖途径的相对贡献，特别是用于核苷酸合成和NADPH生成的分支。
丝氨酸合成途径通量测定：追踪从3-磷酸甘油酸到丝氨酸的单碳代谢流，该途径为嘌呤合成和甲基化反应提供前体，与细胞增殖密切相关。
氨基酸转运与交换通量分析：测定细胞内外特定氨基酸的交换速率，了解细胞对必需氨基酸的依赖程度以及非必需氨基酸的自身合成能力。
核苷酸从头合成与补救合成通量评估：利用标记的前体物区分经从头合成途径和补救合成途径生成的嘌呤与嘧啶核苷酸的比例，反映细胞的增殖状态。
活性氧清除相关代谢流监测: 分析通过磷酸戊糖途径和 folate 循环产生的 NADPH 的通量,以及谷胱甘肽合成与再生过程的代谢流,评估细胞的抗氧化能力。
检测范围
肿瘤细胞系代谢重编程研究: 应用于各种人类或动物来源的肿瘤细胞系,揭示其异常活跃的糖酵解、谷氨酰胺分解等特征,为靶向代谢的抗癌药物研发提供依据。
干细胞多能性与分化过程监测: 用于研究胚胎干细胞或诱导多能干细胞在维持干性及向特定谱系分化过程中能量代谢和生物合成通路的动态变化。
免疫细胞活化代谢调控机制解析: 分析T淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞在静息、活化、效应及记忆阶段独特的代谢需求转变,如糖酵解与氧化磷酸化的平衡切换。
神经退行性疾病模型代谢障碍探究: 在阿尔茨海默病、帕金森病等神经细胞模型或组织中,探查线粒体功能异常、能量衰竭及相关代谢通路紊乱的具体环节。
肝脏毒性化合物筛选与安全性评价: 通过检测原代肝细胞或肝细胞系在化合物暴露后关键代谢通路的变化,早期评估药物或化学品的潜在肝毒性作用。