非同源末端连接检测
发布时间:2026-01-05
非同源末端连接检测是评估细胞DNA双链断裂修复能力的关键技术。该检测通过分析经特定方式诱导DNA损伤后,细胞利用NHEJ通路进行修复的效率与保真度。核心检测要点包括修复产物的定量、连接处序列特征分析以及修复动力学研究。检测过程需严格控制诱导损伤的剂量与时间,并采用高灵敏度方法捕获低频修复事件。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
NHEJ修复效率定量分析:该项目通过定量PCR或报告基因系统,精确测量细胞在遭受DNA双链断裂后,通过非同源末端连接通路成功完成修复的分子比例。
修复连接处序列缺失长度分析:该项目利用高通量测序技术,对NHEJ修复后的DNA连接位点进行测序,统计分析在连接过程中被删除的核苷酸数量和模式。
微同源性使用频率评估:该项目检测在NHEJ修复过程中,断裂末端之间短片段同源序列被用于引导连接的频率,评估微同源性对修复准确性的影响。
染色体畸变分析:该项目通过染色体核型分析或荧光原位杂交技术,观察因NHEJ修复错误导致的染色体易位、缺失、环状染色体等大型结构异常。
细胞存活率克隆形成试验:该项目通过计算经过DNA损伤剂处理后的细胞形成克隆的能力,间接评估NHEJ通路整体功能对细胞存活的重要性。
关键修复蛋白招募动力学研究:该项目利用活细胞成像或染色质免疫沉淀技术,实时监测Ku70/Ku80、DNA-PKcs、XRCC4/Ligase IV等核心蛋白在损伤位点的聚集动态。
NHEJ保真度评估:该项目通过比较修复前后特定基因的序列,计算因NHEJ过程引入的突变率,包括点突变、插入和缺失等错误类型。
免疫球蛋白类别转换重组分析:该项目专门在B淋巴细胞中研究由激活诱导胞苷脱氨酶启动的DNA断裂如何通过NHEJ机制完成抗体基因的重组事件。
T细胞受体基因重排检测:该项目分析T淋巴细胞发育过程中,T细胞受体基因片段之间通过NHEJ机制进行V(D)J重排的效率与准确性。
CRISPR/Cas9编辑后indel谱分析:该项目针对经CRISPR/Cas9系统切割的基因组位点,深度测序分析由细胞内源性NHEJ通路介导产生的插入与缺失突变图谱。
检测范围
肿瘤细胞系:各类永生化的人类或动物肿瘤细胞系是研究NHEJ通路功能及其与基因组不稳定性关系的常用模型系统。
原代培养的正常体细胞:从健康组织分离的原代细胞可用于评估个体间NHEJ基础活性的差异以及该通路在维持基因组稳定性中的作用。
基因敲除或敲低的工程化细胞模型:特异性敲除NHEJ关键基因的细胞模型用于研究特定蛋白功能缺失对整体修复能力的影响。
患者来源的淋巴细胞: 从免疫缺陷病患者外周血分离的淋巴细胞可直接用于诊断其是否存在NHEJ相关基因的先天性功能缺陷。
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。
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