免疫细胞激活测定

检测项目

T细胞增殖：评估T细胞在抗原或丝裂原刺激后，通过细胞分裂而数量增加的能力，是衡量细胞免疫应答强度的核心指标。

细胞因子分泌谱：定量检测激活后免疫细胞（如T细胞、NK细胞）释放的多种细胞因子（如IFN-γ, IL-2, TNF-α, IL-4, IL-10等），以判断免疫应答的类型（Th1/Th2/Th17）和强度。

细胞毒性活性：测定细胞毒性T淋巴细胞（CTL）或自然杀伤（NK）细胞识别并杀伤靶细胞（如肿瘤细胞、病毒感染细胞）的效率。

表面激活标志物表达：检测免疫细胞激活后表面分子（如CD69, CD25, CD154, HLA-DR）的上调表达，作为早期或晚期激活的标志。

磷酸化信号蛋白分析：通过流式细胞术或Western Blot检测细胞内信号通路关键蛋白（如STAT, MAPK, AKT）的磷酸化水平，反映信号转导状态。

代谢重编程分析：评估免疫细胞激活后代谢途径（如糖酵解、氧化磷酸化）的变化，代谢状态与细胞功能密切相关。

转录因子表达与核转位：检测关键转录因子（如NF-κB, NFAT, AP-1）的表达水平及从胞浆向细胞核的转位，以确定基因转录的启动。

免疫检查点分子表达：分析PD-1, CTLA-4, TIM-3等抑制性受体在T细胞等表面的表达水平，与细胞耗竭状态相关。

钙离子流检测：监测T细胞受体（TCR）激活后引发的细胞内钙离子浓度瞬时升高，这是早期激活的关键信号事件。

多功能性分析：通过多参数技术同时评估单个细胞产生多种细胞因子和效应分子的能力，以鉴定功能强大的免疫细胞亚群。

检测范围

肿瘤免疫治疗评估：用于评估CAR-T细胞、TCR-T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）等过继性细胞疗法的体外和体内活性。

疫苗效力评价：检测疫苗接种后，机体特异性T细胞和B细胞的激活水平，以评价疫苗诱导的免疫保护效果。

自身免疫性疾病研究：分析患者自身反应性T、B细胞的异常激活机制，探寻疾病发生发展的免疫学基础。

感染免疫监测：评估机体针对病原体（病毒、细菌、寄生虫）的特异性免疫应答强度，如病毒特异性T细胞反应。

免疫抑制剂/激动剂筛选：在药物研发中，用于高通量筛选能够抑制或增强特定免疫细胞功能的新型化合物或生物制剂。

移植免疫研究：检测受者体内针对供体抗原的免疫细胞激活情况，用于预测和监测移植排斥反应。

过敏与炎症研究：分析肥大细胞、嗜碱性粒细胞等效应细胞的脱颗粒和介质释放，以及Th2细胞的激活状态。

先天免疫研究：评估巨噬细胞、树突状细胞、NK细胞等先天免疫细胞在模式识别受体激动剂刺激下的激活与功能。

免疫毒性评价：在药物安全评价中，检测候选药物对免疫系统非预期的抑制或过度激活作用。

基础免疫机制探索：用于研究免疫受体信号转导、免疫突触形成、细胞间相互作用等基础生物学过程。

检测方法

流式细胞术：多参数分析单细胞的表面标志物、细胞内因子、磷酸化蛋白及增殖染料稀释，是免疫细胞功能分析的金标准技术。

酶联免疫斑点法：在单细胞水平定量检测分泌特定细胞因子（如IFN-γ）的免疫细胞频率，灵敏度高，能反映细胞功能。

乳酸脱氢酶释放法：通过检测靶细胞损伤后释放的LDH酶活性，来定量计算效应细胞的细胞毒性杀伤率。

钙离子成像：使用Fluo-3, Fura-2等荧光染料结合荧光显微镜或流式细胞仪，实时动态监测细胞内钙离子浓度的变化。

实时荧光定量PCR：通过检测免疫激活相关基因（如细胞因子、趋化因子、转录因子）的mRNA表达水平变化，评估细胞的激活状态。

Western Blot：用于半定量分析特定信号通路蛋白的总量及磷酸化水平，确认蛋白水平的激活事件。

报告基因系统：将荧光素酶等报告基因置于特定转录因子调控序列下游，通过报告基因表达强度间接反映信号通路的激活程度。

增殖染料稀释法：使用CFSE或CellTrace等荧光染料标记细胞，通过流式细胞术检测子代细胞的染料稀释倍数，精确量化增殖水平。

xCELLigence实时细胞分析：利用微电子生物传感器无标记、实时监测免疫细胞激活引起的粘附性和形态变化。

多重微球免疫分析：基于Luminex或CBA技术，同时定量检测样本中数十种可溶性细胞因子的浓度，获得分泌谱信息。

检测仪器设备

流式细胞仪：核心设备，用于多参数高速分析单细胞的物理和荧光特性，高端配置可进行分选和光谱流式分析。

酶标仪：用于读取ELISA、LDH释放实验、MTT/CCK-8增殖实验等基于吸光度或化学发光的检测结果。

ELISPOT读数仪：自动化的图像采集与分析系统，用于精确计数ELISPOT板孔中的斑点，提高结果的客观性和通量。

荧光显微镜/共聚焦显微镜：用于观察免疫细胞的形态、亚细胞结构定位（如转录因子核转位）、免疫突触形成及钙离子成像。

实时荧光定量PCR仪：用于高灵敏度、定量地分析免疫激活相关基因的转录水平变化。

蛋白质印迹系统：包括电泳仪、转膜仪和化学发光成像系统，用于对特定蛋白进行定性和半定量分析。

Luminex多重检测平台：基于微球编码和流式原理，可同时检测多达数十种生物标志物，高效获取多因子数据。

xCELLigence实时细胞分析仪：提供无标记、实时、动态的细胞功能监测，特别适合动力学研究和高通量筛选。

活细胞成像系统：具备培养箱功能的自动化显微镜，可长时间动态观察活免疫细胞的迁移、相互作用和激活过程。

超速离心机与分选仪：用于从外周血或组织中分离纯化特定的免疫细胞亚群（如PBMC、T细胞、NK细胞），为后续功能测定提供起始材料。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

合作客户展示

部分资质展示