蛋白酶抑制剂添加实验

检测项目

总蛋白浓度：测定样品中所有蛋白质的总量，是评估样品质量和后续实验加样均一性的基础。

目标蛋白活性：检测特定目标蛋白（如酶、受体）的生物学功能，直接反映抑制剂对蛋白活性的保护效果。

蛋白降解片段分析：通过电泳等技术检测蛋白质是否发生非特异性降解，出现小分子量条带。

蛋白酶残留活性：测定添加抑制剂后，样品中残留的蛋白酶活性，评估抑制效率。

磷酸化状态：检测信号通路相关蛋白的磷酸化水平，某些蛋白酶抑制剂能保护翻译后修饰。

免疫反应性：通过Western Blot等免疫学方法检测目标蛋白的抗原表位是否完整。

蛋白质聚集状态：分析蛋白质是否因降解或抑制剂影响而形成不可溶聚集体。

肽谱分析：通过质谱分析蛋白质酶切后的肽段图谱，精确判断降解位点。

抑制剂毒性测试：评估所用蛋白酶抑制剂对后续细胞实验或功能实验的潜在毒性影响。

样品稳定性：在不同温度和时间点下检测上述指标，综合评价抑制剂对样品稳定性的提升。

检测范围

动物组织匀浆液：如肝、脑、肌肉等，富含内源性蛋白酶，是抑制剂应用的关键场景。

培养的细胞裂解物：包括贴壁细胞和悬浮细胞，裂解过程会释放蛋白酶。

植物组织提取物：植物组织中同样含有多种蛋白酶，提取时需添加相应抑制剂。

血清与血浆样本：血液样本中蛋白酶活性复杂，是临床蛋白标志物研究的保护重点。

细菌与酵母裂解物：微生物蛋白提取时，需抑制其特有的蛋白酶体系。

重组蛋白表达上清：保护外源表达的目的蛋白在纯化前不被降解。

体液样本：如尿液、唾液、脑脊液等，其蛋白成分分析需防止降解。

食品与农产品样品：在食品蛋白质组学分析中，保持蛋白质的天然状态。

法医与考古生物样本：从陈旧或降解严重的样本中尽可能获取完整的蛋白信息。

制药过程中的蛋白样品：在生物药（如抗体、酶）的生产与质控环节确保产品完整性。

检测方法

BCA法/ Bradford法：基于比色原理的经典总蛋白浓度定量方法。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）：直观显示蛋白质分子量分布，判断降解情况。

Western Blot 免疫印迹：利用特异性抗体检测目标蛋白的存在、分子量及含量。

酶活性测定：针对具有催化活性的目标蛋白，通过测定其底物转化速率来评估活性。

荧光底物降解法：使用被荧光标记的蛋白底物，高灵敏度地检测样品中残留的蛋白酶活性。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：定量检测特定蛋白的含量，要求蛋白表位完整。

质谱分析（MS）：提供最精确的蛋白质鉴定、修饰和降解片段信息。

高效液相色谱（HPLC）：分离蛋白质或肽段，用于分析纯度和降解产物。

圆二色谱（CD）：分析蛋白质的二级结构，判断抑制剂是否影响蛋白构象。

表面等离子共振（SPR）：检测蛋白质与配体的相互作用能力，反映其功能完整性。

检测仪器设备

分光光度计/酶标仪：用于BCA、Bradford、ELISA及各种酶活性比色/荧光检测的读数设备。

垂直电泳系统：进行SDS-PAGE分离蛋白质的核心装置。

半干/湿式转印仪：将凝胶中的蛋白质转移至膜上，用于后续Western Blot检测。

化学发光成像系统：捕获Western Blot等实验中化学发光信号的高灵敏度成像设备。

高效液相色谱仪（HPLC）：用于蛋白质、肽段的分离与纯化分析。

质谱仪（MS）：如MALDI-TOF或LC-MS/MS，用于蛋白质鉴定和深度分析。

圆二色谱仪：用于研究蛋白质溶液状态下的二级结构变化。

表面等离子共振仪（SPR）：实时、无标记地分析蛋白质相互作用动力学。

超声波细胞破碎仪：用于制备均一的组织或细胞裂解物，过程中需在低温下并添加抑制剂。

-80°C超低温冰箱：长期保存添加了蛋白酶抑制剂的蛋白样品的关键设备，以维持其稳定性。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

合作客户展示

部分资质展示