细胞凋亡相关蛋白分析

检测项目

Caspase-3活性检测：Caspase-3是细胞凋亡的关键执行者，其活化是凋亡进入不可逆阶段的标志，通常通过检测其酶切底物产生的荧光或颜色变化来评估活性。

Caspase-8活性检测：Caspase-8是死亡受体介导的外源性凋亡通路的关键启动蛋白酶，其活性检测有助于区分凋亡的启动通路。

Caspase-9活性检测：Caspase-9是线粒体介导的内源性凋亡通路的核心启动蛋白酶，其活化表明细胞内部凋亡信号被触发。

PARP蛋白剪切分析：多聚ADP核糖聚合酶是Caspase-3的主要底物之一，全长PARP被剪切产生特定片段是凋亡发生的经典分子标志。

Bcl-2家族蛋白表达分析：包括抗凋亡蛋白（如Bcl-2, Bcl-xL）和促凋亡蛋白（如Bax, Bak, Bad）的定量，两者比例决定线粒体外膜通透性。

细胞色素c释放检测：细胞色素c从线粒体释放到胞质是内源性凋亡通路的关键步骤，可通过细胞组分分离或免疫荧光进行检测。

Annexin V/PI双染法：并非直接检测蛋白，但通过Annexin V结合磷脂酰丝氨酸外翻来早期识别凋亡细胞，并用PI区分晚期凋亡和坏死。

凋亡诱导因子分析：AIF是一种不依赖于Caspase的凋亡相关蛋白，当其从线粒体易位至细胞核会引起染色质凝集和大规模DNA片段化。

Survivin表达检测：Survivin是凋亡抑制蛋白家族成员，在大多数肿瘤中高表达，其下调通常与凋亡敏感性增加相关。

Fas/FasL表达分析：Fas（CD95）是重要的死亡受体，与其配体FasL结合可启动外源性凋亡通路，其表达水平影响细胞对凋亡信号的敏感性。

检测范围

贴壁培养细胞：如HeLa、HEK293、各种原代细胞等，可直接在培养皿/板中处理并通过裂解或固定进行蛋白分析。

悬浮培养细胞：如Jurkat、THP-1等淋巴细胞系，需通过离心收集细胞进行后续的蛋白提取和检测。

动物组织样本：从小鼠、大鼠等实验动物的肿瘤、肝脏、脑等器官中提取蛋白质，用于在体研究凋亡情况。

临床病理组织切片：福尔马林固定石蜡包埋或冰冻切片，可用于免疫组织化学或免疫荧光原位分析凋亡蛋白的表达与定位。

血液样本：分离外周血单个核细胞或特定血细胞，分析其在疾病状态或药物处理下的凋亡相关蛋白变化。

植物组织样本：研究植物程序性细胞死亡过程中，植物特有的凋亡相关同源蛋白的表达与功能。

微生物细胞：研究酵母或细菌在特定压力下发生的类凋亡现象及相关蛋白的作用。

亚细胞组分：通过差速离心等技术分离线粒体、细胞质、细胞核等组分，分别分析其中凋亡蛋白的分布与转位。

蛋白质提取物：来自任何生物样本的总蛋白或膜蛋白、核蛋白等分级提取物，适用于多种免疫学检测。

细胞培养上清液：用于检测某些可溶性凋亡相关因子或由凋亡细胞释放的蛋白标志物。

检测方法

蛋白质免疫印迹法：即Western Blot，是定性或半定量分析特定凋亡蛋白表达水平、剪切状态和分子量的金标准方法。

酶联免疫吸附试验：即ELISA，可用于定量检测细胞裂解液或血清中特定凋亡相关蛋白的浓度，灵敏度高，适合批量样本。

免疫组织化学/免疫荧光：在组织切片或细胞爬片上原位显示凋亡蛋白的空间分布、表达强度及亚细胞定位，提供形态学关联信息。

流式细胞术：利用荧光标记抗体对单个细胞进行多参数分析，可同时检测多种凋亡蛋白并分析其在异质细胞群中的表达差异。

Caspase活性比色/荧光法：基于特异性底物被活化的Caspase酶切后产生颜色或荧光变化，直接测量Caspase家族的酶活性。

免疫共沉淀与Pull-down：用于研究凋亡信号通路中蛋白质之间的相互作用，如Bcl-2家族成员间的结合，或Caspase与抑制剂的结合。

蛋白质芯片技术：高通量筛选技术，可在一张芯片上同时检测成百上千种凋亡相关蛋白的表达或磷酸化状态。

质谱分析：基于质谱的蛋白质组学技术，可无偏向性地鉴定和定量凋亡过程中发生变化的全部蛋白质，并分析翻译后修饰。

报告基因检测法：构建含有特定凋亡反应元件的报告基因质粒，转染细胞后通过报告基因活性间接反映上游信号通路的激活状态。

原位末端标记法：如TUNEL法，虽然主要标记DNA断裂，但常与凋亡蛋白检测联用，共同确认凋亡的发生。

检测仪器设备

SDS-PAGE电泳系统：用于Western Blot的第一步，根据分子量大小分离蛋白质样品中的各种凋亡相关蛋白。

蛋白质转印仪：将经过电泳分离的蛋白质从凝胶转移至硝酸纤维素膜或PVDF膜上，以便进行后续的免疫检测。

化学发光成像系统：用于捕获和定量Western Blot膜上由酶促化学发光反应产生的信号，是蛋白表达定量的关键设备。

酶标仪：用于读取ELISA、Caspase活性检测等实验的吸光度或荧光值，实现快速、准确的批量样本定量。

流式细胞仪：对经荧光抗体标记的单个细胞进行多参数、高通量的快速分析，是研究细胞群体中凋亡蛋白表达的强大工具。

激光共聚焦显微镜：用于高分辨率的免疫荧光成像，可清晰观察凋亡蛋白在细胞内的精确定位和共定位情况。

组织切片扫描仪：将免疫组化染色的整张组织切片数字化，便于后续的定量分析和长期存档。

蛋白质芯片扫描仪：专门用于读取蛋白质芯片上的高密度信号点，实现高通量蛋白质表达谱分析。

液相色谱-串联质谱联用仪：蛋白质组学研究的核心设备，用于深度鉴定和定量复杂样本中的凋亡相关蛋白质及其修饰。

多功能微孔板检测仪：整合吸光度、荧光、发光等多种检测模式，适用于多种形式的Caspase活性检测和细胞活力联用实验。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

合作客户展示

部分资质展示