抗氧化应激细胞模型验证

检测项目

细胞活力测定：评估抗氧化物质对氧化应激所致细胞死亡的拮抗作用，是模型验证的基础指标。

活性氧（ROS）水平检测：直接量化细胞内超氧阴离子、过氧化氢等自由基的含量变化，是核心检测项目。

丙二醛（MDA）含量测定：通过检测脂质过氧化终产物MDA的水平，反映细胞膜受氧化损伤的程度。

超氧化物歧化酶（SOD）活性：测定细胞内关键抗氧化酶SOD的活力，评估细胞自身的抗氧化酶防御系统状态。

过氧化氢酶（CAT）活性：检测CAT分解过氧化氢的能力，是细胞内清除过氧化物的关键酶活性指标。

谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性：评估以谷胱甘肽为底物的过氧化物清除酶系的活性。

还原型谷胱甘肽（GSH）与氧化型谷胱甘肽（GSSG）比值：GSH/GSSG比值是反映细胞内氧化还原状态最灵敏的指标之一。

过氧化氢（H2O2）诱导的氧化损伤模型验证：使用外源性H2O2建立应激模型，验证抗氧化剂的保护效果。

线粒体膜电位检测：氧化应激常导致线粒体功能损伤，通过检测膜电位变化评估线粒体健康状态。

抗氧化反应元件（ARE）报告基因活性：通过荧光素酶等报告基因系统，检测Nrf2/ARE信号通路的激活情况。

检测范围

人肝癌细胞系（HepG2）：代谢活跃，常用于药物代谢和肝毒性相关的抗氧化应激研究。

人神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y）：广泛应用于神经退行性疾病相关的氧化应激模型构建。

人脐静脉内皮细胞（HUVEC）：用于研究心血管疾病中氧化应激对内皮细胞的损伤及保护机制。

小鼠巨噬细胞系（RAW 264.7）：常用于研究炎症与氧化应激的相互作用及抗炎抗氧化物质的评价。

人胚肾细胞系（HEK-293）：易于转染，常用于构建报告基因系统以研究抗氧化信号通路。

大鼠心肌细胞系（H9c2）：适用于心脏缺血再灌注等心血管疾病相关的氧化应激研究。

人皮肤成纤维细胞：用于研究紫外线、衰老等引起的皮肤氧化损伤及化妆品原料的功效评价。

小鼠肝细胞系（AML12）：非转化的小鼠正常肝细胞，适用于更接近生理状态的肝氧化应激研究。

人结肠癌细胞系（Caco-2）：可分化为肠上皮样细胞，用于研究肠道屏障功能的氧化损伤与保护。

原代培养的神经元或心肌细胞：虽然培养难度大，但能最真实地反映特定组织在氧化应激下的反应。

检测方法

CCK-8法：基于水溶性四唑盐，通过检测吸光度快速、灵敏地测定细胞增殖与毒性。

DCFH-DA荧光探针法：最常用的ROS检测方法，探针被ROS氧化后产生绿色荧光，可用流式细胞仪或荧光显微镜检测。

硫代巴比妥酸（TBA）法：经典的分光光度法，通过MDA与TBA反应生成红色产物，测定脂质过氧化水平。

WST-8法测SOD活性：基于黄嘌呤氧化酶产生的超氧阴离子与WST-8反应，SOD抑制此反应，通过吸光度计算活性。

钼酸铵法测CAT活性：通过检测CAT分解H2O2后剩余的H2O2与钼酸铵复合物的吸光度，来计算酶活性。

DTNB法测GSH含量：DTNB与GSH反应生成黄色产物，在412nm处有特征吸收峰，用于定量总GSH和GSSG。

JC-1荧光染色法：通过荧光染料JC-1在正常线粒体中形成红色聚合物，在去极化时呈绿色单体，红绿荧光比值反映膜电位。

双荧光素酶报告基因检测法：将含有ARE序列的报告质粒转染进细胞，通过检测荧光素酶活性来定量通路激活程度。

Western Blotting：检测抗氧化通路相关蛋白（如Nrf2、HO-1、NQO1）的表达水平变化。

实时荧光定量PCR（qPCR）：从mRNA水平检测抗氧化酶及相关因子（如SOD、CAT、Nrf2）的基因表达变化。

检测仪器设备

酶标仪：具备吸光度、荧光和化学发光检测功能，用于细胞活力、酶活性和报告基因等多种检测。

流式细胞仪：用于精确、高通量地检测细胞内ROS水平、线粒体膜电位及细胞周期、凋亡等参数。

荧光倒置显微镜：配备CCD相机，用于观察细胞形态、荧光探针的定位及半定量分析。

实时荧光定量PCR仪：用于精确检测抗氧化相关基因的mRNA表达水平变化。

化学发光成像系统：用于Western Blotting、报告基因等化学发光信号的捕获和定量分析。

超微量分光光度计：用于快速、微量地检测核酸、蛋白样本的浓度和纯度。

低温高速离心机：用于细胞、组织样本的快速离心分离，制备上清用于各项生化指标检测。

细胞培养箱：提供恒定的温度（37℃）、湿度及CO2浓度（5%），是细胞培养和模型构建的核心设备。

超净工作台：提供无菌操作环境，用于所有涉及细胞培养、传代、加药等操作。

液氮罐：用于长期保存各类细胞系，确保实验所用细胞背景的一致性。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

合作客户展示

部分资质展示