代谢产物液相质谱检测
发布时间:2026-04-02
本检测系统阐述了代谢产物液相质谱检测技术的核心内容。文章详细介绍了该技术涵盖的典型检测项目、广泛的检测范围、关键的分析方法以及核心的仪器设备构成。通过四个主要部分,为读者提供了关于如何利用液相色谱-质谱联用技术对生物体内小分子代谢物进行定性、定量分析的全面技术视角。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
氨基酸及其衍生物:检测生物体内20多种常见氨基酸及其代谢衍生物,反映蛋白质代谢与营养状态。
有机酸:分析三羧酸循环、脂肪酸氧化等关键能量代谢途径中的中间产物,如柠檬酸、琥珀酸等。
脂肪酸与酰基肉碱:定量短链、中链、长链脂肪酸及其酰基肉碱形式,评估脂质代谢与线粒体功能。
糖类与糖代谢中间体:检测葡萄糖、果糖及糖酵解、磷酸戊糖途径中的中间代谢物。
核苷酸及其代谢物:分析嘌呤、嘧啶核苷酸及其降解产物,关联细胞增殖与能量状态。
胆汁酸:检测多种初级和次级胆汁酸,用于研究肝脏功能、肠道菌群代谢及脂质消化。
激素及信号分子:包括类固醇激素、儿茶酚胺等,揭示内分泌与细胞信号传导状态。
维生素与辅酶:定量水溶性与脂溶性维生素及其活性形式,评估机体辅酶水平与氧化还原状态。
神经递质:检测多巴胺、5-羟色胺、谷氨酸等,反映神经系统化学传递功能。
外源性物质及其代谢物:分析药物、环境污染物在体内的代谢转化产物,用于毒理学与药代动力学研究。
检测范围
靶向定量分析:针对已知结构的特定代谢物群进行绝对或相对定量,具有高灵敏度与准确性。
非靶向代谢组学:大规模、无偏向性地检测样本中所有可测代谢物,用于发现新的生物标志物。
脂质组学分析:系统鉴定与定量细胞或组织中所有脂质分子,涵盖甘油酯、磷脂、鞘脂等大类。
能量代谢物分析:聚焦于ATP、ADP、AMP、NADH等与细胞能量状态直接相关的代谢物。
植物次生代谢物:检测黄酮类、生物碱、萜类等植物特有的代谢产物,用于植物生理与中药研究。
微生物代谢产物:分析细菌、真菌等微生物分泌或胞内的小分子代谢物,研究微生物功能与互作。
细胞培养上清液分析:监测细胞培养基中代谢物的消耗与分泌,反映细胞代谢表型。
体液样本分析:广泛应用于血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液等生物体液代谢轮廓分析。
组织与细胞提取物分析:对动物组织、植物组织或细胞裂解液中的内源性代谢物进行提取与检测。
稳定同位素示踪代谢流分析:追踪经13C、15N等标记的前体物质在代谢网络中的流向与转化速率。
检测方法
反相液相色谱法:最常用的色谱分离方法,基于代谢物疏水性差异进行分离,适用于多数中等极性至非极性代谢物。
亲水相互作用色谱法:用于分离高极性、亲水性代谢物,如糖、氨基酸、有机酸等,弥补反相色谱的不足。
超高效液相色谱:采用小粒径色谱柱和高压系统,大幅提高分离度、灵敏度与分析速度。
电喷雾电离:最主流的软电离技术,使液态样品中的分析物形成气态带电离子,适用于大多数极性代谢物。
大气压化学电离:适用于弱极性或非极性、热稳定性较好的代谢物的电离,常作为ESI的补充。
三重四极杆质谱多反应监测:靶向定量分析的金标准方法,通过选择特定的母离子-子离子对,实现高特异性与高灵敏度检测。
高分辨质谱全扫描:利用轨道阱或飞行时间等高分辨质谱精确测定离子质荷比,用于非靶向代谢物鉴定与筛查。
数据依赖性采集:在MS全扫描基础上,自动选择强度高的离子进行二级碎裂,用于获取代谢物的结构信息。
数据非依赖性采集:无偏向性地对所有离子或设定窗口内的离子进行碎裂,提供更完整的二级谱图信息。
同位素内标定量法:使用稳定同位素标记的代谢物类似物作为内标,校正前处理与电离过程的损失与变异,保证定量准确性。
检测仪器设备
超高效液相色谱仪:提供高压、高精度的流动相输送与梯度混合能力,是代谢物高效分离的核心。
三重四极杆质谱仪:由Q1、Q2、Q3三个四极杆组成,是进行靶向定量代谢物分析的绝对主力设备。
四极杆-飞行时间串联质谱仪:结合了四极杆的离子选择能力与TOF的高分辨、高精度质量分析能力,广泛用于非靶向代谢组学。
轨道阱系列高分辨质谱仪:利用轨道阱质量分析器实现超高分辨率与高质量精度,是代谢物鉴定和复杂基质分析的强大工具。
自动进样器:实现样品盘的高通量、高重复性自动进样,减少人为误差,保证分析效率与稳定性。
柱温箱:精确控制色谱柱温度,以维持色谱分离的重现性,并优化某些热敏性代谢物的分离效果。
真空系统:为质谱仪的离子源、质量分析器和检测器提供必需的高真空环境,是质谱正常工作的基础。
数据采集与处理工作站:控制仪器运行、采集原始数据,并配备专业软件进行峰提取、对齐、鉴定和定量分析。
代谢物数据库与软件:如HMDB、METLIN、MassBank等公共数据库及Compound Discoverer、MS-DIAL等处理软件,用于代谢物鉴定与通路分析。
样品前处理设备:包括高速离心机、涡旋振荡器、氮吹仪、固相萃取装置等,用于代谢物的提取、净化和浓缩。
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。
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