色谱柱效评估

检测项目

理论板数：评价色谱柱分离效率的核心指标，表示色谱柱在单位长度内能实现的理论平衡级数，数值越高通常代表柱效越好。

峰对称因子：用于量化色谱峰拖尾或前伸的程度，理想值为1，偏离越大表明色谱柱活性位点或装填可能存在问题。

保留因子：反映溶质在固定相和流动相之间分配能力的参数，用于评估色谱柱对目标物的保留特性是否合适。

分离度：直接衡量色谱柱对相邻两组分分离能力的指标，是柱效、选择性和保留因子的综合体现。

柱压降：在特定流速下，色谱柱入口与出口之间的压力差，反映色谱柱的渗透性和装填均匀性。

拖尾因子：与峰对称因子类似，是另一种常用（如USP法）计算峰不对称性的方法，评估色谱峰的拖尾情况。

容量因子：溶质在固定相中的调整保留时间与死时间的比值，是色谱热力学性质的重要参数。

死时间：不被固定相保留的组分从进样到出现峰最大值所需的时间，用于计算其他保留参数。

峰高与峰面积重复性：在连续进样中，考察色谱系统（包括色谱柱）的稳定性和重现性。

色谱峰展宽：通过测量峰宽或方差，评估由涡流扩散、传质阻力等动力学因素引起的峰展宽效应。

检测范围

反相色谱柱：适用于评估以C18、C8等键合硅胶为固定相的柱子，用于分离非极性和中等极性化合物。

正相色谱柱：适用于评估以硅胶、氰基、氨基等极性固定相为主的柱子，用于分离极性化合物。

离子交换色谱柱：适用于评估带有离子交换基团的固定相，用于分离离子型或可离解化合物。

尺寸排阻色谱柱：适用于评估以多孔材料为固定相的柱子，根据分子流体力学体积进行分离。

亲和色谱柱：适用于评估具有生物特异性识别能力的固定相，如抗体、酶等配基键合柱。

手性色谱柱：适用于评估含有手性选择剂的固定相，用于对映异构体的分离效能评估。

制备色谱柱：适用于评估内径和尺寸较大的色谱柱，侧重于载样量、回收率及在过载情况下的分离能力。

UHPLC/HPLC色谱柱：涵盖超高效液相色谱柱和高效液相色谱柱的效能评估，评估压力与粒径差异下的表现。

毛细管气相色谱柱：适用于评估内径细小的气相色谱开管柱，评价其相比、液膜稳定性等。

填充柱气相色谱柱：适用于评估内填固定相颗粒的气相色谱柱，评价其相比与惰性。

检测方法

理论板数计算法：根据色谱图上的保留时间和峰宽，使用公式N=16(tR/W)^2或N=5.54(tR/W_h)^2进行计算。

峰对称性测量法：在色谱峰10%峰高处测量前坡和后坡宽度，通过As=W0.1后/W0.1前或USP拖尾因子公式计算。

分离度计算法：通过相邻两峰的保留时间差和峰宽，使用公式Rs=2(tR2-tR1)/(W1+W2)计算分离度。

压力-流速曲线法：在不同流速下测量柱压降，绘制曲线以评估色谱柱的装填质量和渗透性。

等度洗脱测试法：使用单一或恒定比例的流动相，注入测试样品，评估柱效和峰形的基本参数。

梯度洗脱测试法：使用随时间变化的流动相组成进行洗脱，评估色谱柱在梯度条件下的性能重现性和峰容量。

标准物质测试法：使用已知性质的标准化合物（如烷基苯、苯系物、特定药物）进行测试，便于不同柱子间的性能比较。

van Deemter曲线法：测定不同线性流速下的理论板高，绘制H-u曲线，以确定最佳流速和评估传质动力学。

连续进样重复性测试法：对同一样品进行多次连续进样，计算保留时间、峰面积等关键参数的相对标准偏差。

系统适应性测试法：将色谱柱置于完整的色谱系统中，按照药典或标准方法运行，综合评估其是否满足特定应用要求。

检测仪器设备

高效液相色谱仪：提供稳定的高压输液系统、进样器和检测器，是进行液相色谱柱效评估的核心平台。

气相色谱仪：配备气路控制系统、进样口和检测器，用于气相色谱柱的柱效评估。

紫外-可见光检测器：最常用的HPLC检测器之一，用于检测具有紫外或可见光吸收的测试化合物。

示差折光检测器：通用型检测器，用于检测无紫外吸收的化合物，如糖类，在柱效评估中也有应用。

荧光检测器：高灵敏度检测器，适用于能产生荧光的测试物质，用于评估微量分析时的柱效。

蒸发光散射检测器：另一种通用型检测器，适用于非挥发性化合物的检测，用于相应色谱柱的评估。

质谱检测器：提供高选择性和结构信息，常用于复杂测试混合物或需要精准定性时的柱效评估。

自动进样器：确保进样体积精确、重现，对于获得可靠的保留时间和峰面积数据至关重要。

柱温箱：提供精确且稳定的柱温控制，以评估温度对柱效和保留行为的影响。

数据采集与处理系统：色谱工作站或软件，用于采集色谱图、自动计算理论板数、对称因子等各种柱效参数。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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