体外细胞抑制试验

检测项目

细胞增殖抑制率测定：评估待测物质对细胞增殖能力的抑制效果，是评价抗肿瘤药物活性的核心指标。

细胞毒性评估：检测物质对细胞的直接杀伤或损伤作用，常用于药物安全性评价。

半数抑制浓度（IC50）计算：确定抑制50%细胞增殖或活性的药物浓度，用于量化药效强度。

克隆形成抑制试验：评价药物对细胞群体长期增殖和自我更新能力的抑制，反映其对干细胞或肿瘤干细胞的效应。

细胞周期分布分析：检测药物处理是否将细胞阻滞在细胞周期的特定时相（如G1期、S期或G2/M期）。

细胞凋亡诱导检测：评估药物诱导程序性细胞死亡的能力，常用Annexin V/PI双染等方法。

细胞活力测定：通过检测代谢活性（如MTT法）来反映活细胞的比例和状态。

迁移抑制试验：研究药物对细胞横向迁移能力的抑制作用，常用于抗肿瘤转移研究。

侵袭抑制试验：在迁移基础上加入基质胶屏障，评估药物抑制细胞穿透胞外基质的能力。

血管生成抑制评估：通过内皮细胞管腔形成实验等，检测药物抑制新生血管形成的能力。

检测范围

抗肿瘤药物筛选：针对各类肿瘤细胞系，高通量筛选具有潜在治疗价值的化合物。

天然产物活性评价：对植物提取物、海洋生物活性物质等进行体外抗肿瘤或细胞毒活性初筛。

化学合成物药效学测试：评估新合成化合物对特定细胞模型的生物活性。

生物技术产品（如抗体、细胞因子）功能研究：检测其对靶细胞增殖或功能的调节作用。

纳米材料生物安全性评估：研究纳米颗粒、材料等对细胞存活和功能的影响。

化妆品及日用化学品原料毒性测试：评估其成分对皮肤细胞等的刺激性或毒性。

环境污染物细胞毒性监测：检测重金属、有机污染物等对细胞的毒性效应。

中药复方或单体的作用机制研究：在细胞水平阐明其药效物质基础及作用途径。

放射治疗增敏剂评价：检测药物是否能增强放射线对肿瘤细胞的杀伤效果。

联合用药效应分析：研究两种或多种药物联用对细胞抑制的协同、相加或拮抗作用。

检测方法

MTT比色法：利用线粒体琥珀酸脱氢酶还原MTT生成紫色甲臜，通过吸光度值反映细胞活力和数量。

CCK-8法：基于水溶性四唑盐WST-8被细胞内脱氢酶还原生成橙色甲臜，灵敏度高，操作简便。

SRB染色法：使用磺酰罗丹明B染色细胞总蛋白，适用于贴壁细胞，结果稳定。

台盼蓝拒染法：通过计数不能排除台盼蓝的死细胞，直接评估细胞膜完整性及死亡率。

克隆形成实验：将低密度接种的细胞经药物处理后培养，计数形成的细胞集落，评估群体依赖性增殖。

EdU/BrdU掺入法：通过检测胸腺嘧啶核苷类似物掺入新合成DNA的量，直接反映DNA复制和细胞增殖。

流式细胞术PI染色法：用碘化丙啶（PI）染色DNA，通过流式细胞仪分析细胞周期各时相的分布。

Transwell迁移/侵袭实验：利用带微孔膜的Transwell小室，定量分析细胞迁移或侵袭穿过膜的能力。

划痕愈合实验：在单层细胞上制造划痕，观察药物处理后划痕区域的细胞迁移修复能力。

高通量筛选（HTS）平台：结合自动化液体处理、微孔板读数和数据分析系统，实现大规模化合物库的快速筛选。

检测仪器设备

酶标仪（微孔板读数仪）：用于读取MTT、CCK-8等比色法或荧光法的吸光度或荧光值，是核心检测设备。

CO2细胞培养箱：为细胞提供恒定的温度（37℃）、湿度和CO2浓度（通常5%）的稳定生长环境。

生物安全柜：提供无菌操作空间，保护操作人员、样品及环境，是细胞实验的基础设备。

倒置显微镜：用于日常观察细胞形态、生长密度、划痕愈合情况及克隆形成状态。

流式细胞仪：用于细胞周期分析、凋亡检测（如Annexin V/PI）及细胞表面标志物分析等高通量单细胞分析。

自动化液体处理工作站：实现细胞接种、药物添加等步骤的自动化，提高通量和重复性。

离心机：用于细胞收集、洗涤、重悬等常规操作。

超净工作台：提供局部洁净环境，用于无菌操作，但不同于生物安全柜，不提供人员保护。

细胞计数仪（或血球计数板）：用于精确计数细胞悬液中的细胞浓度，确保实验接种密度一致。

低温冰箱（-80°C）和液氮罐：用于长期保存细胞株、血清及重要试剂，保障细胞资源的稳定性。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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