化疗药物敏感性测试

检测项目

细胞活力测定：评估药物处理后存活细胞的比例，是衡量药物敏感性的基础指标。

半数抑制浓度测定：计算抑制50%细胞生长所需的药物浓度，用于量化药物效力。

克隆形成能力检测：评价单个肿瘤细胞增殖形成集落的能力，反映药物对肿瘤干细胞样细胞的长期影响。

细胞凋亡检测：通过检测磷脂酰丝氨酸外翻、Caspase活化等标志，确定药物诱导的程序性细胞死亡程度。

细胞周期分析：检测药物对细胞周期各时相分布的影响，判断药物是否引起周期阻滞。

DNA损伤响应检测：评估药物引起的DNA双链断裂及修复蛋白的激活状态。

多药耐药蛋白表达分析：检测P-糖蛋白等外排泵的表达水平，预测药物的外排耐药性。

代谢活性检测：通过MTT、CCK-8等方法，间接反映活细胞的线粒体代谢功能状态。

三维培养模型药敏测试：在更接近体内环境的类器官或球状体模型中评估药物反应。

联合用药指数分析：评估两种或多种化疗药物联用时的协同、相加或拮抗效应。

检测范围

铂类药物：包括顺铂、卡铂、奥沙利铂等，通过引起DNA交联发挥细胞毒作用。

抗代谢类药物：如5-氟尿嘧啶、吉西他滨、甲氨蝶呤，干扰核酸合成。

拓扑异构酶抑制剂：包括伊立替康、拓扑替康及依托泊苷等，影响DNA复制与转录。

微管蛋白抑制剂：涵盖紫杉醇、多西他赛、长春新碱等，干扰有丝分裂纺锤体功能。

烷化剂：如环磷酰胺、替莫唑胺，使DNA烷基化导致链断裂或错误配对。

蒽环类药物：包括阿霉素、表阿霉素，通过插入DNA和抑制拓扑异构酶II起作用。

靶向化疗药物：如培美曲塞（抗叶酸）、曲贝替定（影响转录）等具有特定作用机制的药物。

激素类药物：针对激素依赖性肿瘤，如他莫昔芬、来曲唑等。

新型抗体偶联药物：包含由单克隆抗体与细胞毒性载荷偶联而成的药物。

临床试验阶段新药：在临床前或临床研究阶段的新型化疗化合物。

检测方法

MTT比色法：利用线粒体酶还原黄色MTT为紫色甲臜，通过吸光度定量细胞活力。

CCK-8法：基于水溶性四唑盐被还原生成橙色甲臜染料，操作简便且毒性低。

ATP生物发光法：检测细胞内ATP含量，其水平与活细胞数高度相关，灵敏度高。

流式细胞术凋亡检测：使用Annexin V/PI双染法区分早期凋亡、晚期凋亡及坏死细胞。

集落形成实验：将低密度接种的细胞经药物处理后培养，染色计数形成的集落数。

患者来源类器官培养与药筛：将患者肿瘤组织培养成3D类器官，进行高通量药物筛选。

微流控芯片技术：在芯片上构建微组织或细胞阵列，实现低样本量、多条件的平行测试。

高通量测序辅助分析：结合基因测序结果（如突变、表达谱）预测药物敏感性并验证。

动态实时细胞分析技术：使用阻抗法无标记、实时监测药物处理下细胞的生长曲线变化。

CETSA/MSD热稳定性检测：基于药物与靶蛋白结合会改变其热稳定性的原理，评估靶点结合情况。

检测仪器设备

二氧化碳培养箱：为体外培养的肿瘤细胞提供恒定的温度、湿度和CO2浓度的生长环境。

生物安全柜：提供无菌操作空间，保障样本处理和实验过程免受污染，保护操作者安全。

倒置相差显微镜：用于日常观察贴壁细胞的形态、密度和生长状态变化。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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