荧光定量PCR仪核酸完整性分析
发布时间:2026-07-08
本检测详细阐述了利用荧光定量PCR仪进行核酸完整性分析的技术体系。本检测系统介绍了该技术涵盖的核心检测项目、广泛的检测范围、标准化的检测方法流程以及所需的关键仪器设备。通过解析十个关键指标,旨在为分子生物学研究、临床诊断及质量控制领域的专业人员提供一套完整、实用的核酸完整性评估方案。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
基因组DNA完整性指数:通过分析长片段与短片段扩增效率的比值,定量评估DNA样本的降解程度。
总RNA完整性数:基于核糖体RNA(18S和28S)的峰高比例及基线信号,对RNA降解程度进行数字化评分。
mRNA完整性评估:针对管家基因或特定功能基因的3‘端与5’端序列进行差异扩增,判断mRNA是否发生断裂。
抑制剂残留检测:通过比较已知标准品在待测样本与纯水中的扩增效率,检测样本中是否存在PCR抑制剂。
核酸浓度精确定量:基于标准曲线法,对样本中的DNA或RNA进行绝对定量,确认其浓度是否符合下游实验要求。
外源DNA污染筛查:设计物种特异性引物探针,检测样本中是否存在细菌、真菌或其他非目标物种的核酸污染。
基因组DNA中RNA污染检测:使用不含DNase的逆转录酶预处理后直接进行qPCR,评估DNA样本中是否残留RNA。
单链与双链核酸比例分析:结合特异性染料或探针,区分并定量样本中单链和双链核酸的相对含量。
特定片段大小分布分析:通过设计跨越不同长度片段的引物对,评估核酸样本中不同大小片段的存留情况。
扩增曲线形态学分析:观察扩增曲线的起跳点、斜率和平台期高度,间接判断模板完整性和反应体系优化程度。
检测范围
临床组织标本:如福尔马林固定石蜡包埋组织、新鲜冷冻组织等来源的核酸完整性分析。
血液及体液样本:包括全血、血清、血浆、唾液、尿液等液体活检样本中的循环核酸。
细胞培养物:贴壁或悬浮培养的动物、植物及微生物细胞提取的核酸。
法医与考古样本:陈旧、微量或高度降解的疑难生物检材的核酸质量评估。
植物组织样本:富含多糖多酚的复杂植物材料所提取核酸的完整性检测。
微生物群落核酸:环境宏基因组或宏转录组研究中,复杂微生物群落总DNA/RNA的质量控制。
病毒颗粒核酸:从病毒培养上清或临床样本中提取的病毒基因组RNA/DNA的完整性验证。
测序文库构建前质检
基因编辑产物验证:评估CRISPR/Cas9等基因编辑后,目标区域基因组DNA的结构完整性。
长期储存样本复核:对液氮或-80℃冰箱中长期保存的珍贵核酸样本进行定期质量复核。
检测方法
多重荧光PCR法
TaqMan探针法
SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix法
AACq(ΔΔCq)比较法
AACq(ΔΔCq)比较法
AACq(ΔΔCq)比较法
检测仪器设备
AACq(ΔΔCq)比较法
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。
合作客户展示
部分资质展示