顺式茉莉酮信号通路测试

检测项目

顺式茉莉酮含量测定：定量分析植物组织或细胞中顺式茉莉酮的绝对浓度，是通路激活状态的核心指标。

茉莉酸异亮氨酸含量测定：检测JA-Ile活性形式的水平，该物质是关键的信号分子，直接与受体结合。

COI1受体蛋白表达量分析：检测茉莉酮信号核心受体COI1的基因转录与蛋白表达水平。

JAZ蛋白家族成员表达分析：定量测定JAZ阻遏蛋白家族多个成员的丰度，其降解是信号启动的关键步骤。

MYC2转录因子活性检测：评估核心转录因子MYC2的磷酸化状态、核定位及DNA结合活性。

下游防御基因表达谱分析：检测如VSP、PDF1.2、PR蛋白等茉莉酮响应基因的mRNA表达变化。

蛋白酶体活性测定：评估26S蛋白酶体的活性，因为JAZ蛋白的降解依赖于该途径。

组蛋白修饰状态分析：检测茉莉酮信号通路相关基因位点的组蛋白乙酰化、甲基化等表观遗传修饰。

活性氧爆发监测：测定由茉莉酮信号触发的早期活性氧产生动力学。

钙离子流检测：分析胞内钙离子浓度变化，钙信号是茉莉酮通路的上游事件之一。

检测范围

模式植物组织：包括拟南芥、烟草的叶片、根、花、果实等不同器官和组织。

重要农作物：涵盖水稻、小麦、玉米、番茄、棉花等在生物胁迫与非生物胁迫下的材料。

细胞悬浮培养体系：用于研究均一细胞群体对茉莉酮处理的即时响应。

亚细胞组分：分离细胞核、细胞质、叶绿体等组分，进行定位检测。

转基因与突变体材料：检测COI1、JAZ、MYC2等功能缺失或过表达突变体中的信号变化。

病原菌侵染部位：精准采集病原菌（如灰霉菌）侵染点及邻近组织的样品。

昆虫取食损伤组织：针对昆虫（如蚜虫、棉铃虫）取食后的特定叶片区域进行检测。

不同生长发育阶段：涵盖种子萌发、幼苗期、营养生长期、开花期和衰老期。

非生物胁迫处理样本：包括干旱、盐碱、低温、UV照射等处理后的植物材料。

外源激素处理时间序列样本：施加茉莉酸甲酯等诱导剂后，在不同时间点（分钟到天数）取样。

检测方法

液相色谱-串联质谱法：用于精确测定顺式茉莉酮、JA-Ile等激素及其代谢物的绝对含量，灵敏度高。

气相色谱-质谱联用法：适用于挥发性茉莉酮类化合物的定性与定量分析。

实时荧光定量PCR：检测信号通路相关基因（如JAZ， MYC2， 防御基因）的转录水平变化。

蛋白质免疫印迹法：分析COI1， JAZ， MYC2等关键蛋白的表达量及修饰状态。

免疫共沉淀技术：用于研究COI1-JAZ复合物、MYC2与DNA的相互作用等蛋白质互作。

酶联免疫吸附测定法：基于特异性抗体，快速批量检测植物样品中茉莉酮类物质的相对含量。

报告基因检测系统：利用GUS， LUC或GFP报告基因融合启动子，直观显示信号通路的时空激活模式。

染色质免疫共沉淀测序：在全基因组范围内鉴定MYC2等转录因子的下游靶基因结合位点。

荧光染料成像技术

电生理记录技术

检测仪器设备

超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪

气相色谱-质谱联用仪

实时荧光定量PCR仪

化学发光成像系统

激光共聚焦扫描显微镜

多功能酶标仪

超速离心机

全自动化学发光图像分析系统

非损伤微测系统

高通量测序平台

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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