植物抗病性蛋白表达分析检测
发布时间:2025-06-27
植物抗病性蛋白表达分析检测是评估植物免疫应答机制的关键技术。本检测通过定量特定抗病蛋白的表达水平,分析其时空分布规律及活性状态,为抗病育种、病理机制研究及生物农药开发提供核心数据支撑。检测要点涵盖蛋白定量、定位、互作及功能验证等关键环节。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
总可溶性蛋白定量:采用Bradford/Lowry法,检测范围0.1-2000μg/mL,精度±2%
病程相关蛋白(PR)特异性检测:聚焦PR-1/PR-2/PR-5等家族,定量限0.5ng/μL
抗病受体蛋白(NLR)表达分析:ELISA法定量,灵敏度1.0pg/mL
活性氧代谢酶检测:超氧化物歧化酶(SOD)活性单位测定,精度0.1U/mg prot
防御酶谱分析:苯丙氨酸解氨酶(PAL)动力学检测,线性范围0.05-10U/mL
免疫印迹(Western Blot)定量:HRP/ECL检测系统,动态范围10⁴
蛋白质磷酸化位点检测:Phos-tag™ SDS-PAGE,磷酸化比例解析度±5%
亚细胞定位分析:激光共聚焦显微术,定位精度300nm
蛋白质互作验证:Co-IP结合质谱鉴定,结合常数Kd检测限10⁻⁸M
转录因子活性检测:凝胶迁移实验(EMSA),结合特异性>95%
蛋白酶活性抑制率:病原效应靶标抑制实验,IC50测定误差±5%
过敏反应(HR)相关蛋白检测:HIN1/NdR1蛋白时序表达谱
检测范围
转基因抗病作物:Bt毒蛋白/Cry蛋白在玉米、棉花中的表达量验证
病原菌侵染模型:稻瘟病菌侵染后水稻PBZ1蛋白表达动态监测
抗病育种材料:小麦抗锈病品系中Yr10/Yr26蛋白表达谱筛选
生物诱导剂处理:水杨酸诱导烟草PR-1a蛋白的时空表达分析
病毒载体表达系统:TMV载体表达的病毒外壳蛋白(CP)定量
模式植物突变体:拟南芥snc1突变体中抗病蛋白积累量检测
真菌毒素胁迫:黄曲霉毒素B1胁迫下玉米防御蛋白ZmLox表达
共生菌诱导抗性:菌根真菌诱导的番茄PIN蛋白表达定位
抗病种质资源:野生大豆抗胞囊线虫相关GmPR10蛋白鉴定
植物疫苗评估:病原相关分子模式(PAMP)触发的PTI反应蛋白
病程标志物开发:晚疫病侵染马铃薯中RB蛋白作为早期诊断标志物
基因编辑材料:CRISPR编辑的水稻OsNPR1蛋白功能验证
检测标准
ISO 21415:2006 谷物及制品 小麦蛋白定量基本方法
ISO 21572:2019 食品过敏原检测 蛋白质免疫印迹法通则
GB/T 35887-2018 植物蛋白质检测 聚丙烯酰胺凝胶电泳法
GB/T 19495.4-2018 转基因产品检测 蛋白质检测方法
AOAC Official Method 999.10 植物蛋白免疫测定
ASTM F3136-15 体外诊断试剂蛋白质印迹法验证标准
GB/T 38164-2019 常见食品过敏原蛋白检测 ELISA法
NY/T 3556-2020 植物抗病性鉴定 蛋白质组学技术规程
OIV-MA-AS315-18 葡萄病毒病检测 间接ELISA法
UPOV TG/1/6 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南
检测仪器
多功能酶标仪:配备荧光/化学发光模块,支持96/384孔板动力学检测,实现PR蛋白高通量定量
垂直电泳系统:Mini-PROTEAN Tetra四槽电泳仪,可同步进行12块胶电泳,分辨率达10kDa
全自动化学发光成像仪:16bit冷CCD传感器,灵敏度fg级,用于Western Blot信号采集
激光共聚焦显微镜:配备405/488/561/640nm四激光器,Z轴分辨率0.35μm,实现抗病蛋白亚细胞定位
超高效液相色谱-质谱联用仪:Q-TOF质量分析器,质量精度<1ppm,用于抗病蛋白翻译后修饰鉴定
等温滴定微量热仪:最小检测热功率0.1μW,测定病原效应因子与抗病蛋白结合常数
表面等离子共振仪:检测通道流速范围1-100μL/min,实时监测蛋白互作动力学参数
毛细管电泳系统:紫外/PDA/LIF三检测器,迁移时间重复性RSD<0.5%,用于防御酶纯度分析
蛋白质纯化工作站:AKTA avant系统,支持亲和/离子交换/分子筛层析,纯化重组抗病蛋白
微量差示扫描量热仪:温度扫描速率0.1-90°C/min,测定抗病蛋白热稳定性
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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