植物抗病性蛋白表达分析检测

检测项目

总可溶性蛋白定量：采用Bradford/Lowry法，检测范围0.1-2000μg/mL，精度±2%

病程相关蛋白（PR）特异性检测：聚焦PR-1/PR-2/PR-5等家族，定量限0.5ng/μL

抗病受体蛋白（NLR）表达分析：ELISA法定量，灵敏度1.0pg/mL

活性氧代谢酶检测：超氧化物歧化酶（SOD）活性单位测定，精度0.1U/mg prot

防御酶谱分析：苯丙氨酸解氨酶（PAL）动力学检测，线性范围0.05-10U/mL

免疫印迹（Western Blot）定量：HRP/ECL检测系统，动态范围10⁴

蛋白质磷酸化位点检测：Phos-tag™ SDS-PAGE，磷酸化比例解析度±5%

亚细胞定位分析：激光共聚焦显微术，定位精度300nm

蛋白质互作验证：Co-IP结合质谱鉴定，结合常数Kd检测限10⁻⁸M

转录因子活性检测：凝胶迁移实验（EMSA），结合特异性>95%

蛋白酶活性抑制率：病原效应靶标抑制实验，IC50测定误差±5%

过敏反应（HR）相关蛋白检测：HIN1/NdR1蛋白时序表达谱

检测范围

转基因抗病作物：Bt毒蛋白/Cry蛋白在玉米、棉花中的表达量验证

病原菌侵染模型：稻瘟病菌侵染后水稻PBZ1蛋白表达动态监测

抗病育种材料：小麦抗锈病品系中Yr10/Yr26蛋白表达谱筛选

生物诱导剂处理：水杨酸诱导烟草PR-1a蛋白的时空表达分析

病毒载体表达系统：TMV载体表达的病毒外壳蛋白（CP）定量

模式植物突变体：拟南芥snc1突变体中抗病蛋白积累量检测

真菌毒素胁迫：黄曲霉毒素B1胁迫下玉米防御蛋白ZmLox表达

共生菌诱导抗性：菌根真菌诱导的番茄PIN蛋白表达定位

抗病种质资源：野生大豆抗胞囊线虫相关GmPR10蛋白鉴定

植物疫苗评估：病原相关分子模式（PAMP）触发的PTI反应蛋白

病程标志物开发：晚疫病侵染马铃薯中RB蛋白作为早期诊断标志物

基因编辑材料：CRISPR编辑的水稻OsNPR1蛋白功能验证

检测标准

ISO 21415:2006 谷物及制品 小麦蛋白定量基本方法

ISO 21572:2019 食品过敏原检测 蛋白质免疫印迹法通则

GB/T 35887-2018 植物蛋白质检测 聚丙烯酰胺凝胶电泳法

GB/T 19495.4-2018 转基因产品检测 蛋白质检测方法

AOAC Official Method 999.10 植物蛋白免疫测定

ASTM F3136-15 体外诊断试剂蛋白质印迹法验证标准

GB/T 38164-2019 常见食品过敏原蛋白检测 ELISA法

NY/T 3556-2020 植物抗病性鉴定 蛋白质组学技术规程

OIV-MA-AS315-18 葡萄病毒病检测 间接ELISA法

UPOV TG/1/6 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南

检测仪器

多功能酶标仪：配备荧光/化学发光模块，支持96/384孔板动力学检测，实现PR蛋白高通量定量

垂直电泳系统：Mini-PROTEAN Tetra四槽电泳仪，可同步进行12块胶电泳，分辨率达10kDa

全自动化学发光成像仪：16bit冷CCD传感器，灵敏度fg级，用于Western Blot信号采集

激光共聚焦显微镜：配备405/488/561/640nm四激光器，Z轴分辨率0.35μm，实现抗病蛋白亚细胞定位

超高效液相色谱-质谱联用仪：Q-TOF质量分析器，质量精度<1ppm，用于抗病蛋白翻译后修饰鉴定

等温滴定微量热仪：最小检测热功率0.1μW，测定病原效应因子与抗病蛋白结合常数

表面等离子共振仪：检测通道流速范围1-100μL/min，实时监测蛋白互作动力学参数

毛细管电泳系统：紫外/PDA/LIF三检测器，迁移时间重复性RSD<0.5%，用于防御酶纯度分析

蛋白质纯化工作站：AKTA avant系统，支持亲和/离子交换/分子筛层析，纯化重组抗病蛋白

微量差示扫描量热仪：温度扫描速率0.1-90°C/min，测定抗病蛋白热稳定性

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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