小鼠基因敲除模型检测

检测项目

基因组DNA测序：验证敲除位点序列改变，参数包括测序深度≥30x、覆盖度>95%、变异频率分析。

RT-qPCR检测：定量目标基因mRNA表达水平，参数涉及Ct值计算、相对表达量变化倍数（fold change≥2）、内参基因校正。

Western blot分析：检测蛋白表达缺失，参数涵盖抗体特异性验证、信号强度定量（灰度值分析）、背景噪音控制。

表型观察记录：评估行为学与生理学变化，参数如体重监测间隔24h、活动量表评分（0-10分）、生存率统计。

组织病理学检查：通过H&E染色分析组织损伤，参数包括病变评分系统（0-4级）、细胞浸润程度定量。

流式细胞术：分析细胞表面标志物变化，参数如荧光强度阈值设定、阳性细胞百分比计算、门控策略优化。

ELISA检测：量化血清或组织中特定蛋白水平，参数涉及标准曲线回归（R²>0.98）、检测限≤1pg/mL、重复性CV<5%。

全转录组分析：研究基因表达谱变化，参数包括差异表达基因筛选（p值<0.05）、功能富集分析、RNA完整性数（RIN>7）。

脱靶效应评估：检测非目标编辑事件，参数如预测软件分析误切率、验证位点PCR扩增、测序深度≥20x。

繁殖能力测试：评估生育率影响，参数涉及交配成功率计算、窝仔数统计（平均值±SD）、断奶存活率。

生化指标检测：分析血液代谢变化，参数如血糖浓度测量（mmol/L）、肝功能酶活性（ALT/AST定量）。

免疫组化分析：定位组织中蛋白表达，参数涵盖染色强度半定量评分（0-3+）、特异性对照设置。

检测范围

肝脏组织样本：用于代谢疾病模型研究，评估基因敲除对脂质代谢和酶活性的影响。

脑组织切片：在神经科学领域分析神经元形态变化和突触功能，支撑神经退行性疾病机制探索。

血液样本：检测免疫细胞亚群比例和炎症因子水平，适用于免疫缺陷模型验证。

肿瘤模型组织：研究癌症基因敲除在肿瘤生长抑制中的作用，支持抗癌药物筛选。

胚胎干细胞：验证基因编辑效率和分化潜能，用于发育生物学再生医学研究。

纯合子小鼠品系：筛选遗传均一群体，确保模型稳定性和实验可重复性。

杂合子后代：分析基因剂量效应，探索显性遗传疾病机制。

糖尿病模型应用：检测胰岛素敏感性和血糖调控，支持代谢疾病药物开发。

心血管组织样本：评估心肌功能和血管结构变化，用于心脏病模型病理研究。

感染模型：研究宿主基因在免疫防御中的作用，支撑疫苗和抗感染疗法评价。

行为学实验装置：记录焦虑或认知表型变化，适用于神经精神疾病模型分析。

干细胞分化平台：测试基因敲除对分化路径影响，用于组织工程和再生医学。

检测标准

依据ISO 17025:2017标准进行实验室质量保证体系管理，确保检测结果可靠性。

GB/T 33468-2016基因检测通用要求规范分子生物学方法操作流程。

ASTM E2315-03分子生物学实验室指南提供核酸提取和扩增标准化流程。

ISO 20387:2018生物样本库管理标准指导样本存储和处理程序。

GB/T 27922-2011生物技术产品检测通用要求涵盖遗传毒性测试。

ISO 10993-1生物相容性测试标准评估模型在体内应用安全性。

GB/T 27401-2008实验室质量控制规范确保实验数据精确性和重复性。

ISO 5725-2测量方法与结果准确度标准用于定量分析验证。

GB/T 30988-2014动物实验伦理规范指导模型饲养和操作。

ASTM F1980-21生物材料指南支持组织工程样本检测。

检测仪器

聚合酶链反应仪：用于DNA片段扩增，检测基因敲除位点的存在和序列变异。

高通量测序平台：执行全基因组或靶向测序，验证编辑效率和脱靶效应位置。

荧光显微镜：观察细胞或组织中标记蛋白的表达定位和强度变化。

流式细胞仪：分析细胞表面标志物分布和细胞周期进程，量化免疫表型差异。

酶标仪：量化酶联免疫吸附实验信号强度，支持蛋白水平精确测量。

实时定量PCR系统：精确监测mRNA表达动态变化，提供基因转录水平数据。

组织切片机：制备薄层组织样本用于病理学检查，确保切片均匀性。

生化分析仪：检测血液或体液中的代谢指标浓度，评估生理功能改变。

动物行为测试箱：记录运动活动和认知行为，分析神经表型异常。

蛋白电泳系统：分离和转移蛋白质用于免疫印迹分析，确认蛋白表达缺失。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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