细胞样本流式检测
发布时间:2025-07-01
细胞流式检测是通过激光激发荧光标记物,对悬浮细胞进行高通量多参数分析的技术。核心环节包括样本制备、抗体标记、流体聚焦和光学检测,可定量分析细胞表面标志物、胞内因子及功能状态,需严格控制抗体滴定与补偿调节。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
免疫表型分析:检测CD3/CD4/CD8等淋巴细胞亚群比例,参数包含阳性细胞百分比(%)及平均荧光强度(MFI)
细胞周期检测:碘化丙啶(PI)染色定量G0/G1、S、G2/M期细胞比例,DNA指数分辨率±0.05
细胞凋亡检测:Annexin V-FITC/PI双染法测定早期凋亡率,膜磷脂酰丝氨酸检出限10³细胞/样本
胞内因子检测:破膜固定后检测IL-2/IFN-γ等因子表达,刺激时间控制4-6小时
钙流动力学:Fluo-4 AM染料监测钙离子振荡频率,时间分辨率达500ms/帧
活性氧检测:DCFH-DA探针测定ROS水平,激发波长488nm
线粒体膜电位:JC-1染料红绿荧光比测定,凋亡细胞灵敏度≥95%
增殖跟踪:CFSE染料示踪细胞分裂代数,分裂峰分辨率达8代
血小板活化:CD62P/CD63表达检测,抗凝剂需用枸橼酸钠
干细胞计数:CD34+CD133+双标分析,设门排除碎片阈值FSC>50k
细胞吞噬功能:pHrodo标记微粒测定吞噬率,激发波长561nm
染色体倍体分析:DAPI染色检测DNA非整倍体,CV值<3%
检测范围
外周血单个核细胞:肝素钠抗凝样本需24小时内处理
骨髓造血干细胞:采样体积≥2ml,有核细胞浓度需>10⁶/ml
肿瘤浸润淋巴细胞:组织解离后过70μm滤膜
脐带血免疫细胞:CD45+设门排除有核红细胞干扰
培养细胞系:传代后需恢复生长48小时
胸腹水样本:离心去除纤维蛋白凝块
石蜡包埋组织:需抗原修复处理30分钟
精子功能检测:专用缓冲液维持pH7.2-7.4
植物原生质体:纤维素酶解离时间≤4小时
微生物耐药性:SYTO BC染料标记活菌
外泌体检测:需超速离心富集后CD63/CD81标记
循环肿瘤细胞:EpCAM抗体捕获效率验证
检测标准
ISO 15189:2012医学实验室流式细胞术质量要求
CLSI H42-A2流式细胞仪性能验证标准
GB/T 39730-2020细胞计数通用要求
ICCS/ESCCA共识指南:白血病免疫分型方案
ASTM F2315-18组织工程产品细胞特性标准
GB/T 38725-2020脐带血造血干细胞检测
ISO 20391-2:2019细胞计数方法验证
CAP FLOW方案:淋巴细胞亚群检测规范
GB/T 39729-2020细胞凋亡检测指南
EU Pharmacopoeia 2.7.23细胞制品检测
检测仪器
BD FACSymphony五激光分析仪:配置30参数检测通道,可实现50色高通量分析
Beckman CytoFLEX流式细胞仪:采用APD检测器,灵敏度达3MESF
Miltenyi MACSQuant分选仪:集成微柱磁分选模块,分选纯度>95%
Sony ID7000光谱流式仪:32通道全光谱解析,自动荧光补偿校正
Luminex Guava EasyCyte:微毛细管进样系统,样本量仅需50μl
Thermo Attune NxT声波聚焦流式仪:处理速度10000细胞/秒
Cytek Aurora光谱分析系统:配置405/488/561/640nm四激光光源
Bio-Rad S3e细胞分选仪:微流控芯片分选技术,回收率>90%
Agilent NovoCyte Advanteon:温控样本台维持4-37℃检测环境
Beckman Coulter CytoFLEX SRT:分选收集仓内置CO2培养模块
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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