昆虫分子鉴定检测

检测项目

COI基因测序：针对线粒体细胞色素C氧化酶亚基I进行658bp片段扩增，引物设计遵循Folmer区域LCO1490/HCO2198标准

ITS2序列分析：核糖体内转录间隔区Ⅱ筛查，扩增长度300-500bp，适用于鳞翅目疑难物种区分

16S rRNA鉴别：线粒体小亚基核糖体RNA检测，重点识别鞘翅目幼虫形态学难区分种类

微卫星标记分型：筛选12-15个多态性位点，等位基因频率检测精度±0.01

SNP基因分型：基于Illumina平台进行全基因组单核苷酸多态性扫描，覆盖率≥30X

Wolbachia感染检测：特异引物扩增wsp基因片段，检出限达10拷贝/μL

肠道微生物组分析：16S V3-V4区宏基因组测序，OTU聚类相似度97%

种群遗传结构分析：计算遗传分化指数Fst，群体样本量≥30个体/种群

转基因成分筛查：CaMV 35S启动子与NOS终止子双重PCR验证

抗药性基因检测：kdr突变位点焦磷酸测序，灵敏度1%突变等位基因频率

检测范围

农业害虫检疫：涵盖实蝇科、粉虱科等跨境传播物种的幼虫形态学鉴定补充

仓储物昆虫鉴定：针对象甲科、谷盗科等近缘种的卵及蛹期标本分子溯源

法医昆虫学应用：蝇类幼虫发育阶段判定，误差范围±6小时（25℃恒温条件）

生物多样性调查：膜翅目传粉昆虫群落DNA宏条形码快速筛查

水生昆虫监测：蜉蝣目、毛翅目水质指示物种批量鉴定

博物馆标本复核：百年以上鞘翅目模式标本降解DNA特殊提取

检疫性害虫监测：苹果蠹蛾、红火蚁等入侵物种早期预警

资源昆虫鉴别：蚕蛾科经济物种品系纯度验证

昆虫源食品检测：蜂产品、食用昆虫掺假成分鉴定

寄生虫病媒介溯源：按蚊属近缘种复合体生殖隔离群体鉴定

检测标准

ISO/TS 20887:2020 生物多样性观测分子鉴定通用要求

GB/T 38582-2020 植物检疫昆虫分子鉴定规范

AOAC Official Method 2020.05 食品昆虫源性成分检测

GB/T 34789-2017 生物样本核酸提取质量评价

ISO/IEC 17025:2017 检测实验室通用技术要求

EPPO PM 7/129 DNA条形码植物有害生物鉴定

GB/T 35825-2018 昆虫标本分子生物学检测制样方法

ISO 20391-2:2019 细胞计数方法验证指南

GB/T 30989-2014 高通量测序数据质量控制

ISTA 7-20 种子健康测试分子检测补充规则

检测仪器

自动化核酸提取系统：整合磁珠纯化与超声破碎模块，通量96样本/批，DNA回收率≥85%

梯度PCR仪：支持Touch-down程序，控温精度±0.2℃，满足多重PCR反应条件优化

毛细管电泳仪：微卫星片段分析分辨率1bp，适用片段大小50-500bp

高通量测序平台：Illumina NovaSeq 6000，双端测序读长2×150bp，日均产出6Tb数据

生物分析仪：Agilent 4200 TapeStation，DNA完整性数值（DIN）评估范围1-10

实时荧光定量PCR仪：熔解曲线分析分辨率0.1℃，支持HRM分型检测

超微量分光光度计：检测范围2-7500ng/μL dsDNA，A260/A280比值偏差≤0.05

冷冻研磨仪：液氮环境下组织粉碎粒径≤5μm，适用于几丁质外壳破碎

核酸浓度均一化系统：基于声波聚焦技术，浓度校准偏差±0.5ng/μL

凝胶成像系统：CCD像素2000万，SYBR Green I检测灵敏度10pg DNA

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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