流式细胞术服务检测

检测项目

细胞表型分析：采用多色荧光标记技术，检测CD3/CD4/CD8/CD19/CD56等表面抗原表达，灵敏度达0.01%，分辨率≤0.5μm

细胞周期检测：通过碘化丙啶(PI)染色量化G0/G1/S/G2-M期分布比例，DNA含量测量精度CV值≤5%

细胞凋亡检测：AnnexinV-FITC/PI双染法区分早期凋亡与晚期坏死，膜磷脂酰丝氨酸检出限10³cells/mL

细胞内因子检测：布雷菲德菌素A阻断后，测定IFN-γ/IL-4/TNF-α等因子分泌，破膜试剂使用浓度为0.1%TritonX-100

线粒体膜电位检测：JC-1染料法测定红绿荧光比率变化，检测波长530nm/590nm，极化状态分辨率±5%

钙离子通量检测：Fluo-4/AM负载后动态监测[Ca²⁺]i波动，采样频率10Hz，响应时间≤50ms

活性氧检测：DCFH-DA探针检测H₂O₂/O₂⁻水平，激发波长488nm，发射波长525nm

细胞增殖跟踪：CFSE染料稀释法追踪分裂代数，荧光衰减梯度分辨率≥8代

血小板功能检测：PAC-1抗体结合CD62P表达，剪切力模拟范围0-100dyn/cm²

干细胞计数：CD34+CD45dim细胞群识别，设门策略采用FSC/SSC/Fluorescence三维阈值

检测范围

临床血液样本：外周血/骨髓/脐带血中淋巴细胞亚群绝对计数，符合临床诊断要求

肿瘤免疫微环境：实体瘤解离液中TILs浸润程度分析，组织消化酶活性0.2mg/mL胶原酶IV

疫苗免疫原性评价：接种后PBMC中抗原特异性T细胞频率检测，多肽刺激浓度1μg/mL

细胞治疗产品：CAR-T细胞转染效率验证，检测报告基因GFP表达强度≥10⁴MEFL

造血干细胞移植：CD34+细胞纯度与活性检测，台盼蓝拒染率≥95%

药物毒性筛查：化合物处理后线粒体功能变化，EC50值计算采用四参数拟合

微生物快速鉴定：环境中细菌/酵母菌大小及复杂度分析，前向散射光阈值FSC>50k

植物原生质体：叶肉细胞周期同步化监测，PI染色浓度50μg/mL

海洋浮游生物：藻类叶绿素自发荧光检测，通道配置690/40nm带通滤片

纳米药物载体：PLGA颗粒粒径分布测定，流速控制10μL/min

检测标准

ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》流式分析室间质控规范

CLSIH42-A2《淋巴细胞亚群计数标准方案》设门一致性验证

GB/T39730-2020《细胞计数通用要求》绝对计数微球校准方法

ASTMF2315-18《间充质干细胞表征标准》三系分化潜能流式验证

ICHQ2(R1)分析方法验证：精密度RSD≤15%，线性r²>0.98

USP<1076>细胞治疗产品检测：活细胞比例判定标准

GB/T38576-2020《人类血液样本采集与处理》抗凝剂EDTA-K2浓度1.8mg/mL

ISO20391-1:2018细胞计数校准品溯源性要求

检测仪器

分析型流式细胞仪：配置488nm/640nm/405nm三激光系统，支持18色同步检测，最小检测粒径0.2μm，分析速度≥35,000细胞/秒

分选型流式系统：配备100μm喷嘴，纯化模式回收率≥90%，分选精度4-waypurity>99%，最大分选速度20,000细胞/秒

高通量自动进样器：96孔板连续加载，孔间交叉污染率<0.5%，温度控制4-37℃±0.5℃

液流校准仪：每日执行CS&T质控，CV值维持<3%，激光延时校准精度±0.1μs

荧光补偿矩阵发生器：单阳对照自动补偿，补偿误差修正率≥98%

微球计数校准套装：含绝对计数微球（6μm）及尺寸校准微球（1-15μm），浓度偏差≤5%

数据采集工作站：配备FCS3.1标准输出接口，实时显示FSC/SSC散点图及密度图

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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