dapi细胞凋亡检测

检测项目

细胞核形态学评估：观察核固缩、核碎裂等凋亡标志；具体参数包括核面积减少率（阈值≥30%）、核周长变化率（范围-50%至+50%）和碎片数量计数（单位：个/细胞）。

DAPI染色阳性率检测：量化凋亡细胞比例；参数为阳性细胞百分比（%），测量范围0-100%，分辨率0.1%。

荧光强度定量分析：测量DNA结合DAPI的荧光强弱；参数为平均荧光强度（MFI），检测范围100-10,000AU，线性度R²≥0.99。

凋亡指数计算：综合形态和染色数据评估凋亡程度；参数为凋亡指数（AI），计算公式为（阳性细胞数/总细胞数）×100，精度±2%。

细胞周期关联分析：通过DAPI染色评估DNA含量变化；参数包括G1期、S期、G2期分布比例（%），检测周期48小时。

核浓缩程度测量：量化核密度变化；参数为核像素密度（单位：AU/μm²），范围50-500AU，重复性CV≤5%。

碎片化指数评估：计算核碎片数量与分布；参数为碎片指数（FI），公式为碎片总数/细胞总数，检测限1个碎片。

凋亡早期标记整合：结合膜联蛋白V等标记；参数为双阳性细胞百分比（%），阈值设定10%以上为阳性。

时间依赖性凋亡监测：动态追踪凋亡进程；参数为时间点凋亡率（%/小时），采样间隔1小时，总时长72小时。

药物敏感性测试：评估化合物诱导凋亡效果；参数为半数抑制浓度（IC50），单位μM，测量范围0.01-100μM。

样本质量控制检测：确保染色均匀性和数据可靠性；参数为变异系数（CV%），上限15%。

凋亡与坏死区分分析：基于核形态差异；参数为非凋亡细胞百分比（%），误判率≤3%。

多参数关联建模：整合多个凋亡指标；参数为相关因子（R值），计算基于Pearson系数。

检测范围

肿瘤细胞系研究：包括HeLa、MCF-7等细胞；用于评估化疗药物或放疗诱导的凋亡响应。

原代培养细胞应用：如肝细胞或神经元；监测生理或病理条件下的程序性细胞死亡。

组织切片分析：石蜡包埋或冰冻切片；原位检测疾病模型中的凋亡细胞分布。

血液学样本检测：外周血单核细胞或血小板；研究免疫相关凋亡在自身免疫疾病中的作用。

药物开发高通量筛选：细胞培养板阵列；快速筛选潜在凋亡诱导剂或抑制剂。

毒理学评估：环境毒素或化学品暴露；量化细胞毒性引起的凋亡水平。

发育生物学研究：胚胎或器官发育样本；分析程序性细胞死亡在形态发生中的角色。

干细胞分化监测：多能干细胞培养；跟踪分化过程中凋亡事件的发生率。

传染病模型分析：病毒感染细胞；评估病原体诱导的宿主细胞凋亡机制。

心血管疾病模型：心肌细胞或内皮细胞；研究缺血再灌注损伤导致的凋亡。

植物细胞凋亡检测：农作物或模式植物；评估生物胁迫响应中的细胞死亡。

环境毒物监测：水生生物如鱼类细胞；量化污染物引起的生态毒性凋亡效应。

神经退行性疾病模型：如阿尔茨海默病样本；分析神经元凋亡在疾病进展中的贡献。

检测标准

依据ISO10993-5医疗器械生物学评价-体外细胞毒性测试规范凋亡检测方法。

采用GB/T16886.5医疗器械生物学评价第5部分：细胞毒性试验标准。

参照OECDTG487体外哺乳动物细胞微核试验指南整合凋亡评估。

遵循USP<1033>生物测定验证要求确保数据可靠性。

应用GB/T29473细胞培养技术规范控制样本处理流程。

依据ASTME2520细胞活力标准测试方法进行凋亡关联分析。

采用ISO20391-1细胞计数-实验设计规范优化数据采集。

参照ICHQ2(R1)分析方法验证指南验证检测参数准确性。

依据ISO15189医学实验室质量管理要求确保全过程质量控制。

采用GB/T27025测试和校准实验室能力通用要求执行检测。

检测仪器

倒置荧光显微镜：配备DAPI滤镜组和CCD相机；功能为捕获细胞核荧光信号，实现形态学可视化和初步定量。

流式细胞仪：集成488nm激光和FL1通道；功能为高通量定量分析凋亡细胞百分比和荧光强度。

共聚焦显微镜：具备Z轴扫描和3D重构；功能为精确观察核结构变化，如核碎裂深度和分布。

微孔板读数器：支持荧光模式和多波长检测；功能为自动化测量荧光强度，适用于批量样本筛查。

图像分析软件：基于算法如核分割；功能为计算核面积、周长等形态参数，生成凋亡指数报告。

细胞培养箱：控制温度37°C和CO2浓度5%；功能为维持样品活性，确保检测前细胞状态稳定。

离心机：转速范围100-3000rpm；功能为细胞沉淀和洗涤，辅助染色过程样品处理。

荧光分光光度计：检测范围300-700nm；功能为定量DAPI荧光强度，提供高精度MFI数据。

低温储存设备：温度-80°C；功能为长期保存处理后的样本，保障检测可重复性。

移液器系统：精度0.1μl；功能为精确加样染色试剂，控制浓度和孵育时间变量。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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