扁蕾芴酮细胞凋亡检测

检测项目

细胞活力测定：评估扁蕾芴酮处理后细胞的存活率，是判断其细胞毒性的基础指标。

凋亡形态学观察：通过显微镜直接观察细胞核浓缩、碎裂及凋亡小体形成等典型凋亡形态。

Annexin V-FITC/PI双染法：区分早期凋亡、晚期凋亡及坏死细胞，是定量检测凋亡的经典方法。

Caspase-3/7活性检测：测定关键凋亡执行蛋白Caspase-3和Caspase-7的酶活性，确认凋亡通路激活。

线粒体膜电位检测：使用JC-1等探针检测线粒体膜电位变化，评估线粒体途径在凋亡中的作用。

DNA片段化分析：通过TUNEL法或DNA ladder实验检测凋亡导致的DNA断裂。

凋亡相关蛋白表达：利用Western Blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3等蛋白的表达水平变化。

细胞周期分布分析：通过PI单染流式细胞术分析扁蕾芴酮是否引起细胞周期阻滞并诱导凋亡。

活性氧水平检测：测定细胞内活性氧（ROS）水平，探究氧化应激在扁蕾芴酮诱导凋亡中的角色。

细胞色素c释放检测：从线粒体分离胞浆组分，检测细胞色素c的释放，确认线粒体凋亡途径。

检测范围

人肝癌细胞系（如HepG2, SMMC-7721）：常用于研究扁蕾芴酮抗肝癌作用的体外模型。

人乳腺癌细胞系（如MCF-7, MDA-MB-231）：评估扁蕾芴酮对乳腺癌细胞的抑制效果与凋亡诱导能力。

人肺癌细胞系（如A549, NCI-H460）：研究扁蕾芴酮对抗非小细胞肺癌等细胞的效应。

人结肠癌细胞系（如HCT-116, SW480）：用于探索扁蕾芴酮对消化道肿瘤的凋亡诱导作用。

人白血病细胞系（如HL-60, K562）：研究扁蕾芴酮对血液系统肿瘤细胞的促凋亡活性。

正常人类细胞系（如LO2肝细胞）：作为对照，评估扁蕾芴酮的选择性毒性。

小鼠移植瘤模型组织：从体内实验模型中获取肿瘤组织，进行离体的凋亡指标验证。

原代培养的肿瘤细胞：从临床样本或动物模型中分离的原代细胞，用于更接近生理状态的研究。

三维肿瘤球状体：模拟体内肿瘤微环境的模型，用于研究扁蕾芴酮在更复杂体系中的促凋亡效果。

动物模型器官切片：对给药后动物的心、肝、肾等器官进行切片观察，评估药物在体内的安全性及可能诱导的正常组织凋亡。

检测方法

CCK-8法：基于水溶性四唑盐的比色法，快速、灵敏地检测细胞增殖与毒性。

Hoechst 33342/PI双荧光染色法：荧光显微镜下区分活细胞、凋亡细胞及坏死细胞的核形态特征。

流式细胞术Annexin V/PI双标法：利用流式细胞仪对大量细胞进行快速、定量的凋亡分期统计。

Caspase-Glo® 3/7发光法：基于发光底物的均相检测方法，高通量测定Caspase-3/7活性。

JC-1荧光探针法：通过荧光颜色变化（红到绿）来定性定量检测线粒体膜电位下降。

TUNEL（末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记）法：特异性标记凋亡细胞中断裂的DNA 3'-OH末端，可在组织切片或细胞爬片上原位检测。

Western Blotting免疫印迹法：定性或半定量分析凋亡通路中关键蛋白的表达量与剪切活化情况。

PI单染流式细胞术: 通过检测DNA含量分析细胞周期分布，亚G1峰代表凋亡细胞群。

<强>DCFH-DA荧光探针法: 非荧光性的DCFH-DA被细胞内ROS氧化生成绿色荧光DCF，用于ROS水平检测。

<强>免疫荧光/免疫组化法: 在细胞或组织原位可视化观察特定凋亡相关蛋白（如Cleaved Caspase-3）的定位与表达。

检测仪器设备

<强>酶标仪（多功能微孔板读数仪）: 用于读取CCK-8、发光法Caspase活性、荧光强度等信号的吸光度或光强度值。

<强>倒置荧光显微镜: 配备特定滤光片，用于观察Hoechst、Annexin V-FITC、JC-1等荧光染色样本的形态与定位。

<强>流式细胞仪: 进行Annexin V/PI双染、细胞周期分析、ROS测定等多参数、高通量的细胞水平定量分析的核心设备。

<强>化学发光成像系统或凝胶成像系统: 用于捕获和分析Western Blot、DNA ladder等化学发光或荧光信号图像。

<强>激光共聚焦显微镜: 用于高分辨率、三维观察细胞器水平的变化，如线粒体膜电位、蛋白共定位等。

<强>超微量分光光度计或NanoDrop: 快速、微量地测定提取的蛋白质或核酸样品的浓度与纯度，为下游实验做准备。

<强>垂直电泳槽及转膜系统: Western Blot实验中用于蛋白质分离（SDS-PAGE）和转印至膜上的关键装置。

<强>超速离心机: 用于分离线粒体与胞浆组分，以进行细胞色素c释放等亚细胞水平的检测。

<强>二氧化碳培养箱: 为所有活细胞实验提供恒定的温度、湿度和CO2浓度的培养环境。

<强>生物安全柜/超净工作台: 为无菌操作提供洁净环境，保障细胞培养和实验操作免受污染。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

合作客户展示

部分资质展示