全血提取rna检测

检测项目

RNA浓度检测：采用紫外分光光度法测定，检测范围1ng/μL~2000ng/μL，OD260/OD280标准值1.8~2.1

RNA完整性值（RIN）：通过微流控芯片电泳分析，评估范围1~10，合格阈值≥7.0

基因组DNA残留量：qPCR法定量检测，阈值≤0.01%总RNA量

蛋白质污染物检测：BCA法测定，标准值＜0.1μg/μg RNA

内毒素含量测定：鲎试剂显色法，限值＜0.05EU/μg

28S/18S rRNA比值：毛细管电泳分析，合格标准≥1.5

RNA提取得率计算：(总RNA量/血液体积)×100%，基准值≥5μg/mL

DNase消化效率验证：通过β-actin基因组片段扩增阴性确认

RNA稳定性测试：-80℃储存72小时后降解率≤5%

反转录效率验证：管家基因Ct值变异系数CV＜2%

外源RNA酶污染检测：使用对照RNA降解实验判定

血细胞裂解效率：显微镜检残余完整细胞数＜5个/视野

检测范围

临床EDTA抗凝全血：适用于感染性疾病病原体核酸检测

肝素钠抗凝外周血：用于肿瘤循环RNA标志物研究

新生儿足跟血滤纸片：遗传代谢病基因筛查样本

稀有血型库冻存样本：血型抗原mRNA表达分析

动物全血样本：兽医病原体监测及转基因研究

法医物证血痕：DNA/RNA同步提取的微量样本

血站筛查样本：输血传播病毒RNA检测

药物临床试验样本：药理基因组学分析材料

干细胞治疗产品：造血干细胞分化标记物检测

古DNA研究样本：考古遗骸血渍RNA提取

生物安全样本：高致病性病毒污染血液检测

移植术后监测样本：嵌合体状态RNA标志物追踪

检测标准

ISO 20184-1:2018 分子体外诊断-冷冻全血RNA分离流程

GB/T 37876-2019 核酸提取纯化试剂盒质量评价技术规范

CLSI MM13-A 分子诊断血液标本采集和处理指南

ISO 20395:2019 分子生物学检测用核酸定量要求

GB/T 34796-2017 核酸浓度与纯度检测紫外分光光度法

YY/T 1256-2015 外源RNA酶残留检测方法

EP17-A2 临床实验室检测限建立与验证标准

ISO 15193:2009 体外诊断医疗器械生物源性样本测量

GB/T 40154-2021 高通量测序样本预处理规范

FDA Guidance on Circulating Tumor DNA Assays

检测仪器

Nanodrop OneC紫外分光光度计：检测波长190~850nm，样本量0.5~2μL，自动进行A260/A280/A230比值分析

Agilent 4200 Tapestation系统：通过电泳芯片完成RNA完整性检测，灵敏度达1pg/μL

Qubit 4.0荧光计：RNA高精度定量检测范围0.1~1000ng，采用RNA特异性荧光染料

KingFisher Flex自动提取仪：磁珠法高通量处理，单次运行96样本，温控范围4°C~100°C

Bio-Rad CFX96 qPCR系统：进行gDNA残留检测，温控精度±0.1°C，支持熔解曲线分析

Covaris M220聚焦超声仪：血细胞机械裂解模块，频率＞500Hz，处理量50-500μL

Eppendorf 5430冷冻离心机：预冷离心防止RNA降解，转速300~15,000rpm，温控范围-20°C~40°C

Thermo Fisher Countess 3细胞计数仪：血细胞裂解前质控，分辨率3μm，支持台盼蓝染色识别

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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