定量蛋白质组学silac检测
发布时间:2025-07-01
定量蛋白质组学SILAC检测利用稳定同位素标记技术,精确分析蛋白质表达变化。核心检测要点包括同位素掺入效率评估、肽段定量分析、数据完整性验证等,应用于生物医学研究领域,确保高灵敏度和准确性。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
标记效率检测:评估稳定同位素标记氨基酸掺入率,参数精度±1%,确保标记均匀性。
蛋白质定量分析:测定特定蛋白质相对丰度变化,检测限≤10 fmol,动态范围覆盖三个数量级。
肽段序列鉴定:利用质谱技术确认氨基酸序列,置信度阈值设置为95%以上。
同位素比率计算:计算重链与轻链肽段比率,误差控制<5%,用于差异表达验证。
样品纯度评估:检测蛋白质提取物杂质水平,纯度要求≥98%,优化预处理步骤。
酶解效率监测:测量蛋白酶消化效果,效率指标>90%,确保肽段代表性。
定量准确度验证:通过标准肽段校准,相对标准偏差<15%,保证结果可信度。
数据分析完整性:评估质谱数据覆盖率,覆盖率>80%,防止信息丢失。
质量控制参数设定:包括信噪比阈值>10,提升数据可靠性。
样品稳定性测试:监控检测过程变化率,变化<5%,确保实验一致性。
蛋白质修饰分析:检测磷酸化位点丰度,灵敏度0.1 fmol,用于功能研究。
动态范围校准:验证线性响应区间,范围跨10³-10⁶,适应多样本类型。
检测范围
哺乳动物细胞培养物:用于癌症信号通路研究,评估药物响应机制。
人体组织样本:如肿瘤活检,应用于生物标志物发现和病理分析。
血液及体液样本:包括血浆和血清,支持疾病诊断模型开发。
微生物培养体系:细菌或酵母样本,研究抗生素耐药性蛋白变化。
植物组织样本:农作物叶片或根茎,用于抗逆性育种优化。
药物开发模型:候选药物处理样本,评估毒性及疗效蛋白质谱。
神经疾病模型:如阿尔茨海默病脑组织,探究退行性蛋白动态。
环境污染样本:受污染物暴露生物体,分析毒性应激响应。
食品及农产品:乳制品或谷物,检测蛋白质组成安全指标。
临床诊断样本:患者活检或分泌物,用于个性化医疗指导。
干细胞分化体系:监控分化过程蛋白表达谱,支持再生医学。
免疫学研究样本:抗体或细胞因子表达分析,应用于疫苗开发。
检测标准
ISO 17025:2017检测和校准实验室能力的一般要求。
ISO/IEC 15189:2012医学实验室质量和能力规范。
GB/T 27476-2011检测实验室安全要求规范。
ASTM E2857-13蛋白质组学数据报告指南。
ISO 20486:2010蛋白质定量分析方法标准。
GB/T 33215-2016蛋白质组学检测技术要求。
ISO 5725-2:2019测量方法准确度估计规范。
GB/T 17592-2011蛋白质检测通用技术规范。
ASTM E2677-10生物样品稳定性测试标准。
ISO 10993-18生物材料蛋白质组学评估指南。
检测仪器
液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS):实现肽段分离和定量,分辨率>100,000,确保高精度测量。
高分辨率质谱仪:如Orbitrap系统,提供精确质量分析,质量误差<2 ppm。
高效液相色谱系统(HPLC):配备反相色谱柱,流速范围0.1-1.0 mL/min,用于样品纯化。
台式离心机:转速可达15,000 rpm,处理样品沉淀和澄清步骤。
紫外-可见分光光度计:波长范围190-1100 nm,测定蛋白质浓度,精度±0.1 Abs。
凝胶电泳装置:支持SDS-PAGE分离,电压范围50-200 V,用于预筛样品。
数据处理工作站:运行定量分析软件,处理复杂数据集,输出比率结果。
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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