cck8测细胞毒性检测

检测项目

细胞活力测定：评估细胞存活百分比，参数包括吸光度值（OD450nm，测量范围0.1-3.0）、空白对照设置、活力计算公式：活力% = (OD样品 - OD空白) / (OD对照 - OD空白) × 100%，检测精度±5%。

IC50值计算：确定半最大抑制浓度，参数包括浓度梯度（如0.01-100μM，步进10倍稀释）、非线性回归分析（使用四参数逻辑模型）、结果报告单位为μM或nM，偏差控制<10%。

细胞增殖抑制率：量化化合物对细胞生长的抑制效果，参数包括处理时间（24-72小时，间隔24小时）、抑制率公式：抑制率% = (1 - OD处理 / OD对照) × 100%，重复性要求RSD<5%。

时间依赖性毒性：评估毒性随时间的累积效应，参数包括时间点（0, 24, 48, 72小时）、活力变化曲线、斜率分析，时间分辨率1小时。

剂量反应关系：分析剂量与细胞活力的相关性，参数包括EC50值、Hill斜率（范围0.5-2.0）、剂量范围对数尺度，相关系数R²>0.95。

细胞毒性指数：综合量化毒性程度，参数包括CTI计算公式：CTI = (对照活力 - 样品活力) / 对照活力 × 100，指数范围0-100，精度±3%。

形态学变化观察：结合显微镜评估细胞损伤，参数包括细胞圆缩比例（%）、空泡化程度（分级0-3）、观察放大倍数40-100倍。

细胞死亡类型初步区分：识别凋亡或坏死特征，参数包括附加染色（如Annexin V阳性率）、形态评分，分类准确度>90%。

线粒体脱氢酶活性：直接测量酶功能，参数包括活性单位（U/mL）、反应动力学曲线、时间常数计算，灵敏度0.01 U/mL。

细胞周期影响评估：分析化合物对细胞周期的影响，参数包括G1/S/G2期比例（%）、流式细胞术辅助数据，周期阻滞阈值设定。

膜完整性测试：评估细胞膜损伤，参数包括LDH释放量（μU/mL）、对照比值、损伤指数计算，检测限0.1 μU/mL。

氧化应激指标：测量活性氧产生，参数包括ROS水平（相对荧光单位）、时间依赖性变化、抗氧化剂对照，精度±5%。

检测范围

抗癌药物筛选：评估新化合物对肿瘤细胞系的毒性，应用领域包括白血病、乳腺癌等细胞模型研究。

化妆品成分安全测试：检测护肤品、彩妆中的活性成分细胞毒性，确保人体安全性符合法规要求。

医疗器械材料生物相容性：评估植入物、导管等材料的体外细胞毒性，覆盖聚合物、金属合金等材料类型。

环境污染物检测：分析工业化学品、重金属等对水生或哺乳动物细胞的毒性效应。

食品添加剂和污染物安全：测试防腐剂、色素等添加剂在胃肠道模型中的细胞毒性风险。

农药和除草剂毒性研究：评估农业化学品对非靶标细胞的影响，支持生态毒理学研究。

纳米材料生物安全性：检测纳米颗粒、量子点等新型材料的细胞毒性，应用于纳米技术产品开发。

基因治疗载体评估：测试病毒载体、质粒DNA对靶细胞的毒性，优化基因治疗策略。

干细胞治疗产品安全：评估干细胞制剂对受体细胞的潜在毒性，确保临床应用可靠性。

生物制品质量控制：检测抗体、疫苗等生物制品的细胞毒性杂质，保障生产批次一致性。

工业化学品注册：支持REACH等法规要求的细胞毒性数据生成，覆盖溶剂、染料等类别。

消费品安全测试：评估玩具、纺织品等产品中化学物质的细胞毒性，符合全球市场准入。

检测标准

ISO 10993-5：医疗器械生物学评价体外细胞毒性试验方法，要求细胞活力降低不超过30%。

ASTM E2525：细胞毒性标准测试方法指南，规范浓度设置和数据处理流程。

GB/T 16886.5：中国医疗器械生物学评价第5部分体外细胞毒性试验标准，等效ISO 10993-5。

OECD TG 129：化学品测试指南细胞毒性测定方法，用于环境风险评估。

USP <87>：美国药典体外生物反应性测试标准，涵盖细胞毒性筛选。

ISO 19003：体外细胞毒性试验的质量控制要求，确保实验可重复性。

GB/T 21793：化学品体外细胞毒性试验方法国家标准，适用于工业产品安全评估。

检测仪器

多功能酶标仪：用于读取450nm吸光度值，功能：测量CCK8反应产物的OD值，支持高通量96孔或384孔板。

CO2培养箱：维持37°C、5% CO2恒定环境，功能：确保细胞在标准条件下生长和测试。

生物安全柜：提供HEPA过滤无菌操作区，功能：防止样本污染和人员保护。

倒置显微镜：配备相衬功能，功能：实时观察细胞形态变化，评估毒性损伤程度。

离心机：转速范围100-1500×g，功能：分离细胞悬液，制备均匀细胞样本。

自动细胞计数器：基于图像分析，功能：快速测定细胞密度和活力，精度±2%。

恒温水浴：温度控制精度±0.5°C，功能：优化试剂孵育条件，确保反应一致性。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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