检测项目

血清总胆红素(TBIL):酶比色法测定,检测范围0.1-800μmol/L,精度±5%

直接胆红素(DBIL):钒酸盐氧化法,线性范围0.05-342μmol/L,CV≤3%

间接胆红素(IBIL):通过TBIL与DBIL差值计算

谷丙转氨酶(ALT):IFCC推荐法,检测限2U/L,分析范围3-1000U/L

谷草转氨酶(AST):动力学法,分辨率0.1U/L,温度控制37±0.1℃

碱性磷酸酶(ALP):PNPP底物法,波长405nm,孵育时间30min

γ-谷氨酰转移酶(GGT):L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺法,检测范围3-1000U/L

血清胆汁酸(TBA):酶循环法,反应温度37℃,样本量5μl

肝组织HE染色:苏木精-伊红双染,切片厚度4μm,病理分级Knodell评分

肝羟脯氨酸含量:碱水解法,检测波长558nm,标准曲线r²≥0.99

超氧化物歧化酶(SOD):WST-8法,灵敏度0.01U/ml,避光反应

丙二醛(MDA):TBA比色法,离心速度3000rpm×10min,检测波长532nm

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px):DTNB显色法,温育时间5min,单位定义μmol/min/mg

肝脏指数:肝湿重/体重比,电子天平精度0.1mg

检测范围

α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导模型:胆管上皮损伤型黄疸,造模周期5-7天

胆总管结扎模型(BDL):机械性梗阻性黄疸,结扎后72小时采样

四氯化碳肝纤维化模型:化学性肝损伤继发黄疸,油剂浓度10-50%

D-半乳糖胺急性肝衰模型:核苷酸代谢干扰型,剂量500-800mg/kg

镰刀菌毒素T-2诱导模型:真菌性肝损伤黄疸,染毒周期28天

胆红素代谢基因敲除鼠:UGT1A1缺陷型遗传性黄疸

利福平药物性肝损模型:胆红素转运抑制,给药剂量100-150mg/kg

妊娠期胆汁淤积模型:雌激素介导肝内胆汁淤积,孕鼠孕晚期检测

胆汁酸受体FXR敲除鼠:胆盐代谢紊乱型黄疸

肝移植排斥反应模型:免疫性胆管损伤,术后7天组织采样

酒精性肝病模型:Lieber-DeCarli液体饲料,乙醇浓度5%,周期8周

胆道闭锁模型:新生鼠胆管手术造模,术后21天评估

全血样本:肝素抗凝管采集,离心条件3000g×15min

肝组织匀浆液:低温匀浆器制备,组织:缓冲液=1:9(w/v)

胆汁样本:胆管插管收集,-80℃避光保存

检测标准

ASTM F2105-01(2020) 实验动物生化分析前处理规范

ISO 15189:2012 医学实验室质量要求

GB/T 35892-2018 实验动物福利伦理审查指南

GB/T 39760-2021 实验动物血液采集规范

GB 14925-2010 实验动物环境及设施

YY/T 1673-2019 血清总胆红素测定试剂盒

WS/T 404.5-2015 临床常用生化检验项目参考区间

OECD 413 亚慢性吸入毒性试验指南

ICH S3A 毒代动力学研究指南

中国药典2020年版 9203 药品微生物实验室规范

AAALAC 国际认证动物管理标准

ARRIVE 2.0 动物研究报告指南

检测仪器

全自动生化分析仪:日立7180型,波长范围340-800nm,支持双试剂检测,执行血清酶学指标定量

双光束紫外分光光度计:Shimadzu UV-2600,带宽1nm,积分球附件,测定胆红素特征吸收光谱

冰冻切片机:Leica CM1950,切片厚度1-100μm,温控精度-1℃,制备肝组织病理切片

化学发光成像系统:Bio-Rad ChemiDoc MP,CCD分辨率1360×1024,检测SOD等酶活性

高效液相色谱仪:Agilent 1260 Infinity II,DAD检测器,色谱柱C18 5μm,定量胆汁酸组分

超速离心机:Beckman Optima XPN-100,最大转速100,000rpm,分离血清脂蛋白组分

实时荧光定量PCR仪:ABI QuantStudio 5,热循环速度4.5℃/s,检测胆红素代谢基因表达

激光共聚焦显微镜:Zeiss LSM 900,Z轴分辨率0.3μm,三维重建胆管结构

电感耦合等离子体质谱仪:Thermo iCAP RQ,检测限ppt级,分析肝组织微量元素

动物代谢笼系统:TSE PhenoMaster,代谢笼数量12联,同步监测胆汁排泄动力学

检测服务范围

1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。