小鼠黄疸模型检测

检测项目

血清总胆红素（TBIL）：酶比色法测定，检测范围0.1-800μmol/L，精度±5%

直接胆红素（DBIL）：钒酸盐氧化法，线性范围0.05-342μmol/L，CV≤3%

间接胆红素（IBIL）：通过TBIL与DBIL差值计算

谷丙转氨酶（ALT）：IFCC推荐法，检测限2U/L，分析范围3-1000U/L

谷草转氨酶（AST）：动力学法，分辨率0.1U/L，温度控制37±0.1℃

碱性磷酸酶（ALP）：PNPP底物法，波长405nm，孵育时间30min

γ-谷氨酰转移酶（GGT）：L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺法，检测范围3-1000U/L

血清胆汁酸（TBA）：酶循环法，反应温度37℃，样本量5μl

肝组织HE染色：苏木精-伊红双染，切片厚度4μm，病理分级Knodell评分

肝羟脯氨酸含量：碱水解法，检测波长558nm，标准曲线r²≥0.99

超氧化物歧化酶（SOD）：WST-8法，灵敏度0.01U/ml，避光反应

丙二醛（MDA）：TBA比色法，离心速度3000rpm×10min，检测波长532nm

谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）：DTNB显色法，温育时间5min，单位定义μmol/min/mg

肝脏指数：肝湿重/体重比，电子天平精度0.1mg

检测范围

α-萘异硫氰酸酯（ANIT）诱导模型：胆管上皮损伤型黄疸，造模周期5-7天

胆总管结扎模型（BDL）：机械性梗阻性黄疸，结扎后72小时采样

四氯化碳肝纤维化模型：化学性肝损伤继发黄疸，油剂浓度10-50%

D-半乳糖胺急性肝衰模型：核苷酸代谢干扰型，剂量500-800mg/kg

镰刀菌毒素T-2诱导模型：真菌性肝损伤黄疸，染毒周期28天

胆红素代谢基因敲除鼠：UGT1A1缺陷型遗传性黄疸

利福平药物性肝损模型：胆红素转运抑制，给药剂量100-150mg/kg

妊娠期胆汁淤积模型：雌激素介导肝内胆汁淤积，孕鼠孕晚期检测

胆汁酸受体FXR敲除鼠：胆盐代谢紊乱型黄疸

肝移植排斥反应模型：免疫性胆管损伤，术后7天组织采样

酒精性肝病模型：Lieber-DeCarli液体饲料，乙醇浓度5%，周期8周

胆道闭锁模型：新生鼠胆管手术造模，术后21天评估

全血样本：肝素抗凝管采集，离心条件3000g×15min

肝组织匀浆液：低温匀浆器制备，组织:缓冲液=1:9(w/v)

胆汁样本：胆管插管收集，-80℃避光保存

检测标准

ASTM F2105-01(2020) 实验动物生化分析前处理规范

ISO 15189:2012 医学实验室质量要求

GB/T 35892-2018 实验动物福利伦理审查指南

GB/T 39760-2021 实验动物血液采集规范

GB 14925-2010 实验动物环境及设施

YY/T 1673-2019 血清总胆红素测定试剂盒

WS/T 404.5-2015 临床常用生化检验项目参考区间

OECD 413 亚慢性吸入毒性试验指南

ICH S3A 毒代动力学研究指南

中国药典2020年版 9203 药品微生物实验室规范

AAALAC 国际认证动物管理标准

ARRIVE 2.0 动物研究报告指南

检测仪器

全自动生化分析仪：日立7180型，波长范围340-800nm，支持双试剂检测，执行血清酶学指标定量

双光束紫外分光光度计：Shimadzu UV-2600，带宽1nm，积分球附件，测定胆红素特征吸收光谱

冰冻切片机：Leica CM1950，切片厚度1-100μm，温控精度-1℃，制备肝组织病理切片

化学发光成像系统：Bio-Rad ChemiDoc MP，CCD分辨率1360×1024，检测SOD等酶活性

高效液相色谱仪：Agilent 1260 Infinity II，DAD检测器，色谱柱C18 5μm，定量胆汁酸组分

超速离心机：Beckman Optima XPN-100，最大转速100,000rpm，分离血清脂蛋白组分

实时荧光定量PCR仪：ABI QuantStudio 5，热循环速度4.5℃/s，检测胆红素代谢基因表达

激光共聚焦显微镜：Zeiss LSM 900，Z轴分辨率0.3μm，三维重建胆管结构

电感耦合等离子体质谱仪：Thermo iCAP RQ，检测限ppt级，分析肝组织微量元素

动物代谢笼系统：TSE PhenoMaster，代谢笼数量12联，同步监测胆汁排泄动力学

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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