mtt增殖检测

检测项目

细胞密度梯度测试：设置500-50,000 cells/孔梯度，验证线性响应范围，OD值差异≤0.05

MTT反应动力学监测：在37℃下每15分钟采样，确定最佳反应时段（通常2-4小时）

甲臜溶解效率验证：测试DMSO、SDS等溶剂溶解时间（标准值10-20分钟），残留颗粒≤5μm

代谢抑制率测定：计算IC50值，精确度±0.5log单位，重复测试CV值<8%

血清干扰分析：对比0-20%血清浓度下OD值波动，偏差控制≤±5%

PH敏感性测试：检测PH6.8-7.8缓冲体系中甲臜生成稳定性

光稳定性验证：考察甲臜溶液在避光/光照条件下4小时吸光度衰减率

温度响应曲线：建立4℃-40℃环境下的酶活性变化模型

细胞周期关联性：同步化细胞后检测G1/S期OD值差异

线粒体特异性验证：添加鱼藤酮抑制剂评估非线粒体还原占比

孔间均一性控制：96孔板边缘效应校正，CV值≤10%

代谢产物干扰排除：测试黄嘌呤氧化酶等竞争性还原酶的影响

检测范围

抗肿瘤药物筛选：蒽环类化合物、铂类药物细胞毒性EC50测定

生物材料相容性：钛合金植入物溶出物对成骨细胞增殖影响

抗体药物开发：CD20单抗对淋巴瘤细胞系的生长抑制曲线

纳米粒子安全性：量子点、二氧化钛颗粒的剂量依赖性细胞毒性

化妆品原料评价：防腐剂对表皮角质形成细胞活性的抑制作用

中药活性成分：黄芪皂苷、雷公藤内酯的增殖调节作用

基因治疗载体：腺相关病毒转染后HEK293细胞代谢状态

辐射生物学：电离辐射后细胞修复能力的时序监测

营养添加剂：维生素D3对肠道上皮细胞增殖的剂量效应

环境污染物：微塑料颗粒对肺泡巨噬细胞的代谢干扰

干细胞分化研究：间充质干细胞成脂诱导过程中的活性变化

抗菌肽筛选：防御素类化合物选择性杀伤肿瘤细胞能力

检测标准

ISO 10993-5:2009 医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验

GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验

ASTM E2526-08(2019) 纳米材料细胞毒性的标准试验方法

USP<87> 体外生物反应性测试通则

JJF 1815-2020 细胞增殖检测试剂盒校准规范

GB/T 39760-2021 细胞培养技术通则

ISO 19007:2018 纳米技术-体外MTS试验评估纳米颗粒毒性

OECD TG 129 体外哺乳动物细胞遗传毒性试验指南

YY/T 0878.1-2013 医疗器械遗传毒性试验第1部分：细菌回复突变试验

EP 2.6.27 细胞培养物中支原体检测方法

检测仪器

酶标分析系统：配备570nm/630nm双波长滤光片，进行96/384孔板吸光度扫描，检测精度±0.005 OD

恒温震荡培养箱：维持37℃±0.5℃及5%CO₂环境，内置轨道震荡模块促进甲臜溶解

自动细胞计数仪：采用台盼蓝排斥法，精度±2%，确保接种细胞浓度准确性

超微量分液系统：精确分配1-50μl MTT试剂，分配误差≤1%

生物安全柜：Class II A2型，维持细胞操作环境无菌状态，沉降菌≤1CFU/m³

倒置相差显微镜：200×相位差观察，实时监控细胞形态及贴壁状态

多通道移液器：8/12通道设计，移液体积0.5-200μl，CV值≤2%

离心式真空浓缩仪：45℃氮气保护下浓缩甲臜溶液，避免氧化降解

恒温混匀仪：30-1500rpm可调，确保甲臜结晶均匀溶解

流式细胞分选平台：同步检测细胞周期分布，验证MTT结果相关性

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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部分资质展示