自动提取rna检测
发布时间:2025-07-01
RNA自动提取检测是分子生物学研究的关键步骤,通过标准化流程实现核酸高效分离。核心检测指标包括纯度、浓度及完整性,需严格遵循生物安全规范,适用于临床诊断、病毒学研究等领域,确保下游实验数据的准确性。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
RNA浓度测定:紫外分光光度法检测,波长260nm,检测范围2-5000ng/μL,OD260/280比值1.8-2.0为合格标准
完整性分析:凝胶电泳法检测,使用1%琼脂糖凝胶,28S/18S rRNA条带比值≥1.8判定为完整
基因组DNA残留:qPCR检测法,引物针对单拷贝基因,阈值循环数Ct值≥35判定合格
蛋白质污染:BCA蛋白定量法,检测限0.5μg/mL,要求低于总RNA量的0.1%
酶抑制剂检测:逆转录效率试验,使用spike-in对照RNA,CT值偏差≤1.5循环
pH值测定:微电极检测法,检测范围5.0-8.5,合格标准6.5-7.5
内毒素检测:鲎试剂显色法,检测限0.01EU/μg,要求≤0.1EU/μg RNA
有机溶剂残留:气相色谱法,乙醇残留≤0.5%,苯酚残留≤0.1%
微生物污染:无菌培养试验,37℃培养72小时无浑浊
冻融稳定性:-80℃三次循环后浓度下降率≤5%
RNase活性检测:荧光底物降解试验,要求ΔRFU/min≤5
粒径分布:动态光散射法,检测范围10-1000nm,多分散指数≤0.3
检测范围
临床血液样本:EDTA抗凝全血样本,需在采集后6小时内处理
组织标本:包括冷冻/石蜡包埋组织,最小样本量10mg
细胞培养物:贴壁/悬浮细胞,检测密度范围1×10⁴-1×10⁷ cells/mL
植物材料:叶片/根茎组织,需特殊裂解缓冲液去除多糖
微生物样本:细菌/真菌培养物,要求菌落数≥1×10⁸ CFU
病毒载体:腺病毒/慢病毒载体,滴度检测范围1×10⁶-1×10¹² VP/mL
法医样本:唾液/毛发/精斑样本,最低检出量0.1ng
环境样本:土壤/水体微生物总RNA,需增加腐殖酸去除步骤
食品基质:肉类/乳制品中病原体RNA,符合ISO 22174预处理规范
单细胞样本:显微操作分离细胞,检测体积≥5μL
FFPE组织:福尔马林固定石蜡包埋样本,切片厚度5-10μm
外泌体RNA:超速离心富集样本,检测下限50copies/μL
检测标准
ISO 20166-3:2020分子体外诊断检验-福尔马林固定样本处理规范
CLSI MM13-A:核酸提取物质量评估标准指南
GB/T 37868-2019 RNA测序样本质量要求
ASTM E3132-18 核酸纯化系统评估标准
YY/T 1527-2017 人类基因检测用核酸提取试剂盒
ISO 20395:2019 分子生物学检测用核酸定量方法
GB/T 34796-2017 核酸浓度测定通则
EP17-A2 临床实验室检测限确定指南
ISO 22174:2005 食源性病原体核酸提取方法
GB/T 38576-2020 人类血液样本RNA保存规范
MIQE指南:实时荧光定量PCR实验最低信息标准
ISO 20184-3:2018 冷冻组织样本分子分析前处理流程
检测仪器
全自动核酸提取仪:磁珠法纯化系统,通量1-96样本/批次,温控精度±0.5℃
微量分光光度计:全波长扫描(200-800nm),光程0.2mm,检测限0.5ng/μL RNA
微流控电泳仪:自动分析RNA完整性指数,分辨率3-5000nt,样本量1μL
实时荧光定量PCR仪:96孔板温控系统,温度均一性±0.2℃,检测通道5色
超低温离心机:最大RCF 30,000×g,温控范围-20℃至40℃
生物分析仪:芯片式电泳系统,检测范围25-5000nt,RIN值计算精度0.1
自动化移液工作站:8通道精密移液,体积范围0.5-1000μL,精度CV≤1%
恒温震荡混匀仪:温度范围4-100℃,振荡频率100-1500rpm
冷冻研磨仪:液氮低温破碎,处理组织样本0.1-5g
真空浓缩离心机:同时处理48样本,温控精度±1℃,压力范围5-1000mbar
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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