无标记蛋白质组学检测

检测项目

蛋白质鉴定覆盖率：采用二级质谱碎片匹配算法，鉴定精度达95%置信度，单样本可识别>5000种蛋白

相对定量分析：基于MS1峰面积积分，定量动态范围10⁴，RSD≤15%

绝对定量验证：通过外标曲线法定量，检出限0.1fmol/μg，线性范围R²>0.99

翻译后修饰检测：磷酸化位点定位精度±0.02Da，修饰肽段检出限5amol

蛋白相互作用分析：共洗脱蛋白相关系数计算，P-value<0.01判定标准

差异表达蛋白筛选：FC≥2.0且p<0.05为显著性阈值，多重检验校正FDR≤0.05

低丰度蛋白富集：高pH反相色谱分级，组分间CV<8%，富集效率>50倍

蛋白完整性评估：N端乙酰化比例检测，正常范围60-80%

样本复杂度分析：肽段长度分布检测，理想范围8-20氨基酸

离子化效率监控：基质效应校正因子0.8-1.2，喷雾稳定性RSD<5%

检测范围

血清/血浆样本：检测浓度范围0.1-100μg/μL，重点监测载脂蛋白及补体系统组分

细胞裂解液：适用哺乳动物/微生物细胞，蛋白提取率要求>85%

组织匀浆液：包括冷冻/FFPE样本，需经激光显微切割富集目标区域

植物蛋白质组：特殊处理木质素干扰，适用叶片/根系/种子样本

外泌体蛋白：分离纯度验证CD63+/CD81+>90%，检测粒径50-150nm囊泡

微生物组蛋白：细菌裂解酶处理规范，革兰氏阳性菌破壁效率>95%

药物靶点研究：受体-配体结合常数测定范围10⁻⁶-10⁻¹²M

疾病标志物筛选：临床样本需符合伦理规范，冻存温度-80℃±2℃

食品蛋白质组：乳制品/肉类过敏原检测，检出限0.1ppm

环境微生物蛋白：水体/土壤样本前处理，腐殖酸去除率>99%

检测标准

ISO 20914:2019 临床质谱实验室规范要求

ISO 21378:2020 蛋白质组学数据质量控制指南

GB/T 39542-2020 蛋白质组学样品制备通则

GB/T 40445-2021 生物质谱定性定量分析方法

ASTM E3133-18 质谱系统性能验证标准

CLSI C62-A 临床质谱验证指南

HUPO-PSI标准数据格式：mzML/mzIdentML数据归档

MIAPE准则：最小化实验信息报告要求

EMA生物分析验证指南：2022版生物标志物验证规范

ICH Q2(R1)：分析方法验证技术要求

检测仪器

Orbitrap Fusion Lumos三合一质谱仪：分辨率240,000@m/z200，实现MS³修饰位点解析

TimS TOF Pro 4D蛋白质组学系统：离子淌度分离分辨率>150，CCS值重复性RSD<0.3%

nanoElute UHPLC系统：75μm毛细管柱，梯度延迟体积<0.5μL，分离精度±0.1min

MClass高通量纳喷离子源：喷雾电压0.8-2.5kV可调，流速范围50-300nL/min

Proteome Discoverer 3.0分析平台：支持Sequest HT/Byonic双算法，FDR校验功能

Bravo自动化样品处理平台：96孔板通量，移液精度CV<3%

Q Exactive HF-X高场质谱仪：扫描速度40Hz，最大注入时间512ms

Evosep One色谱系统：标准方法每日分析100样本，梯度稳定性±0.5%

CaptiveSpray离子源：干燥气温度50-300℃可控，去溶剂效率>99.9%

timsControl 4.0软件：在线CCS值预测误差<1%

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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