荧光定量测试检测

检测项目

Ct值（阈值循环）：测定PCR反应中荧光信号达到设定阈值的循环数，用于起始模板量的相对定量。参数范围通常为15-40循环，精度±0.5循环。

扩增效率：评估PCR反应的效率，计算为斜率相关值。参数标准为90%-110%，偏差需小于5%。

熔解曲线分析：检测扩增产物的特异性，通过熔解温度（Tm）确认。参数Tm值应与预期匹配，范围60-95°C，分辨率0.1°C。

标准曲线斜率：建立浓度与Ct值的线性关系，斜率反映扩增性能。参数斜率为-3.0至-3.5，R²值≥0.99。

检测限（LOD）：确定最小可检测目标量。参数如5 copies/μL，基于置信区间计算。

定量限（LOQ）：可靠定量的最低浓度。参数如10 copies/μL，变异系数CV%<10%。

特异性：验证仅目标序列被扩增。参数如无引物二聚体或非特异性峰，信噪比≥3:1。

灵敏度：检测低丰度目标的能力。参数如检出率≥95%，假阴性率<5%。

重复性：多次测试的变异系数。参数批内CV%<5%，批间CV%<10%。

线性范围：定量动态范围。参数如10^2-10^8 copies，线性相关系数r≥0.98。

背景荧光：最小化非特异性荧光干扰。参数如相对荧光单位RFU<500，基线校正精度±50 RFU。

扩增曲线分析：监测实时荧光增长趋势。参数如指数期斜率，确保无平台期异常。

检测范围

临床诊断：检测病原体如病毒、细菌核酸，用于疾病早期筛查和治疗监测。

食品安全：监测食品中污染物如沙门氏菌或转基因成分，确保产品合规性。

环境监测：分析水质、土壤中微生物或污染物，支持生态风险评估。

农业生物技术：检测转基因作物或种子纯度，保障生物安全。

药物开发：量化基因表达水平，用于靶点验证和药效评估。

法医科学：DNA样本鉴定和亲缘分析，提供法庭证据。

基础研究：基因定量和突变检测，支持分子生物学实验。

动物疾病诊断：检测动物病原如禽流感病毒，防控疫情扩散。

植物病理：识别植物病原体如真菌，优化病害管理。

工业微生物：控制发酵过程微生物活性，确保生产稳定性。

生物制品：疫苗或细胞治疗产品的核酸质量控制。

肿瘤筛查：癌症相关基因标志物检测，辅助早期诊断。

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术 - 核酸定量方法，规范qPCR检测流程。

ASTM E1873-97 实时PCR标准实践，定义扩增参数要求。

GB/T 19495.2-2004 转基因产品检测方法，规定特异性验证。

GB/T 37871-2019 荧光定量PCR检测技术规范，涵盖仪器校准。

ISO 22174:2005 微生物检测通用要求，确保样本处理标准。

GB/T 27403-2008 实验室质量控制规范，管理重复性测试。

ISO 17822:2020 体外诊断试剂性能评估，涉及灵敏度指标。

GB/T 34796-2017 核酸提取纯化方法，规范前处理步骤。

ASTM D5245-92 环境样本分析指南，支持污染物检测。

ISO 17025:2017 检测实验室能力要求，保障整体可靠性。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪：用于实时监测PCR扩增过程中的荧光信号，功能包括温度循环控制和多通道荧光检测，支持Ct值计算。

荧光分光光度计：测量样本荧光强度以定量核酸浓度，功能为光谱扫描和波长校准，确保背景荧光精度。

微孔板阅读器：高通量检测多个样本的荧光信号，功能为自动化孔板读取，提升检测效率。

毛细管电泳仪：分离和定量扩增产物，功能为片段大小分析和荧光检测，验证特异性。

核酸提取仪：自动化纯化核酸样本，功能为磁珠或离心法提取，确保样本质量。

荧光显微镜：可视化荧光标记样本，功能为形态观察和定位分析，辅助验证。

恒温混匀仪：维持反应温度均一性，功能为振荡孵育，减少变异。

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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