外泌体蛋白质组学检测
发布时间:2025-06-30
外泌体蛋白质组学检测通过质谱与生物信息学技术,对囊泡携带的蛋白质进行系统分析,涵盖定量鉴定、翻译后修饰及功能注释等核心环节。检测要点包括低丰度蛋白富集效率、批次间重复性控制及跨平台数据可比性验证,为疾病标志物筛选与药物靶点研究提供分子基础。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
全蛋白质组鉴定:采用液相色谱-串联质谱技术,鉴定样本中≥8000种蛋白质,最低检测限0.1fmol/μg
差异表达蛋白分析:基于TMT标记定量,可识别≥1.5倍表达量变化的蛋白质,CV值≤15%
磷酸化修饰检测:TiO2富集结合MS/MS扫描,鉴定磷酸化位点分辨率达85%,覆盖率≥3000个位点/样本
糖基化图谱分析:凝集素芯片捕获N/O-糖链,鉴定10种核心糖型结构,通量≥50样本/批次
外泌体标志物验证:WB/ELISA正交验证CD9/CD63/CD81等跨膜蛋白,回收率≥90%
蛋白互作网络构建:STRING数据库整合分析,预测置信度≥0.7的互作节点
亚细胞定位注释:GO富集分析定位精度达亚细胞器水平,注释率≥95%
功能通路富集:KEGG通路显著性分析p值≤0.01,FDR校正≤0.05
样本纯度检测:纳米流式检测APO-B/ALB残留,控制阈值≤5%
粒径分布验证:NTA检测30-150nm囊泡占比,要求≥80%符合外泌体特征
检测范围
血清/血浆样本:评估心血管疾病早期诊断标志物,要求采集后2小时内完成预处理
脑脊液外泌体:神经退行性疾病研究样本,最低起始量500μL
细胞培养上清液:肿瘤微环境研究材料,需标注传代次数及培养条件
尿液外泌体:泌尿系统疾病监测样本,建议超速离心法分离
乳汁外泌体:母婴免疫研究材料,保存温度-80℃
组织间液提取物:适用于实体瘤微环境分析,需提供病理分型
干细胞分泌组:再生医学研究样本,建议冻存前添加蛋白酶抑制剂
植物源外泌体:中药材活性成分载体研究,需标明植物种属
工程化外泌体:药物递送系统评估,要求提供修饰方法学报告
微生物囊泡:病原体-宿主相互作用研究材料,需生物安全二级以上操作
检测标准
ISO/TS 21387:2020 细胞外囊泡蛋白质组学分析通用要求
MISEV2018指南 外泌体研究最低信息标准
GB/T 37869-2019 纳米颗粒蛋白质冠检测方法
HUPO-PSI标准 质谱数据格式规范(mzML 1.1.0)
FDA-Biomarker Guidance 生物标志物验证框架文件
EMBO Molecular Medicine 外泌体研究技术白皮书
CLSI C62-A 液相色谱-质谱临床检测标准
GB/T 27417-2017 合格评定 化学分析方法确认指南
检测仪器
Thermo Q Exactive HF-X质谱仪:配备Orbitrap分析器,分辨率240,000@m/z 200,实现外泌体低丰度蛋白检测
Agilent 1290 Infinity II液相色谱:2.1mm微径柱系统,流速50nL/min,保障复杂肽段分离
NanoFCM N30E纳米流式细胞仪:检测下限40nm,完成单囊泡水平表型分析
Beckman Optima XPN-100超速离心机:最大RCF894,000×g,保证外泌体分离纯度
ProteinSimple Maurice全自动电泳仪:执行毛细管免疫检测,CV值≤5%
Bruker timsTOF Pro 4D质谱:IMS分离维数提升,通量达20样本/日
Malvern Panalytical NanoSight NS300:动态光散射技术,粒径检测精度±5nm
检测服务范围
1、指标检测:按国标、行标及其他规范方法检测
2、仪器共享:按仪器规范或用户提供的规范检测
3、主成分分析:对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。
4,样品前处理:对产品进行预处理后,进行样品前处理,包括样品的采集与保存,样品的提取与分离,样品的鉴定以及样品的初步分析,通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;
5、深度分析:根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测,然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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