外泌体蛋白质组学检测

检测项目

全蛋白质组鉴定：采用液相色谱-串联质谱技术，鉴定样本中≥8000种蛋白质，最低检测限0.1fmol/μg

差异表达蛋白分析：基于TMT标记定量，可识别≥1.5倍表达量变化的蛋白质，CV值≤15%

磷酸化修饰检测：TiO2富集结合MS/MS扫描，鉴定磷酸化位点分辨率达85%，覆盖率≥3000个位点/样本

糖基化图谱分析：凝集素芯片捕获N/O-糖链，鉴定10种核心糖型结构，通量≥50样本/批次

外泌体标志物验证：WB/ELISA正交验证CD9/CD63/CD81等跨膜蛋白，回收率≥90%

蛋白互作网络构建：STRING数据库整合分析，预测置信度≥0.7的互作节点

亚细胞定位注释：GO富集分析定位精度达亚细胞器水平，注释率≥95%

功能通路富集：KEGG通路显著性分析p值≤0.01，FDR校正≤0.05

样本纯度检测：纳米流式检测APO-B/ALB残留，控制阈值≤5%

粒径分布验证：NTA检测30-150nm囊泡占比，要求≥80%符合外泌体特征

检测范围

血清/血浆样本：评估心血管疾病早期诊断标志物，要求采集后2小时内完成预处理

脑脊液外泌体：神经退行性疾病研究样本，最低起始量500μL

细胞培养上清液：肿瘤微环境研究材料，需标注传代次数及培养条件

尿液外泌体：泌尿系统疾病监测样本，建议超速离心法分离

乳汁外泌体：母婴免疫研究材料，保存温度-80℃

组织间液提取物：适用于实体瘤微环境分析，需提供病理分型

干细胞分泌组：再生医学研究样本，建议冻存前添加蛋白酶抑制剂

植物源外泌体：中药材活性成分载体研究，需标明植物种属

工程化外泌体：药物递送系统评估，要求提供修饰方法学报告

微生物囊泡：病原体-宿主相互作用研究材料，需生物安全二级以上操作

检测标准

ISO/TS 21387:2020 细胞外囊泡蛋白质组学分析通用要求

MISEV2018指南 外泌体研究最低信息标准

GB/T 37869-2019 纳米颗粒蛋白质冠检测方法

HUPO-PSI标准 质谱数据格式规范（mzML 1.1.0）

FDA-Biomarker Guidance 生物标志物验证框架文件

EMBO Molecular Medicine 外泌体研究技术白皮书

CLSI C62-A 液相色谱-质谱临床检测标准

GB/T 27417-2017 合格评定 化学分析方法确认指南

检测仪器

Thermo Q Exactive HF-X质谱仪：配备Orbitrap分析器，分辨率240,000@m/z 200，实现外泌体低丰度蛋白检测

Agilent 1290 Infinity II液相色谱：2.1mm微径柱系统，流速50nL/min，保障复杂肽段分离

NanoFCM N30E纳米流式细胞仪：检测下限40nm，完成单囊泡水平表型分析

Beckman Optima XPN-100超速离心机：最大RCF894,000×g，保证外泌体分离纯度

ProteinSimple Maurice全自动电泳仪：执行毛细管免疫检测，CV值≤5%

Bruker timsTOF Pro 4D质谱：IMS分离维数提升，通量达20样本/日

Malvern Panalytical NanoSight NS300：动态光散射技术，粒径检测精度±5nm

检测服务范围

1、指标检测：按国标、行标及其他规范方法检测

2、仪器共享：按仪器规范或用户提供的规范检测

3、主成分分析：对含量高的组分或你所规定的某种组分进行5~7天检测。

4，样品前处理：对产品进行预处理后，进行样品前处理，包括样品的采集与保存，样品的提取与分离，样品的鉴定以及样品的初步分析，通过逆向剖析确定原料化学名称及含量等共10个步骤;

5、深度分析：根据成分分析对采购的原料标准品做准确的定性定量检测，然后给出参考工艺及原料的推荐。最后对产品的质量控制及生产过程中出现问题及时解决。

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